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标题: 还是做不出脑切片，请各位老师帮忙！ [打印本页]

作者: llj19971997 时间: 2011-5-15 08:22 标题: 还是做不出脑切片，请各位老师帮忙！

做大鼠的脑组织的石蜡包埋（海马）
时间70% 2h 80% 2h 90% 2h 95% 2h 100% 过夜二甲苯 30min （看着透的，直到没有实心了）石蜡 4h
最后结果切得很好，很平整，也没有脆，碎的现象。但是展片时却无法完全展开，组织上的褶皱很多很细，周围的石蜡都展开了。为什么得不到平整的切片？如果展片时间过长就会发现组织发散。

作者: 轻羽飞扬 时间: 2011-5-15 11:27

100%的时间太长了。

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-5-15 12:58

你用二次展片试试，应该能够改善！

作者: llj19971997 时间: 2011-5-15 15:25

用过二次展片，不行的。100%过夜是和本站的九日老师学的，觉得切片时感觉还是很好的，就是展片不好。很是疑惑。石蜡熔点是58-60度。是不是这个原因呢

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-5-15 15:47

100%酒精过夜,是不对的，只能够在低浓度酒精里过夜！

作者: 九日 时间: 2011-5-15 16:48

引用:

原帖由 llj19971997 于 2011-5-15 15:25 发表
用过二次展片，不行的。100%过夜是和本站的九日老师学的，觉得切片时感觉还是很好的，就是展片不好。很是疑惑。石蜡熔点是58-60度。是不是这个原因呢

你在北京吗？如果在，我欢迎你拿着脑组织到我们实验室做，真的，只有亲自做一遍才能说得清楚，比如蜡的情况。希望联系。我给你发个“短信息”，告诉你联系方式

作者: 九日 时间: 2011-5-15 17:03

做好一张切片，附加的条件很多，比如石蜡、乙醇和二甲苯使用的次数等等，单纯地说出一个条件恐怕不能适应所有的实验室，只是在特定的条件下才可以，我也从中接受教训，不会再单独介绍某一种经验。
一切的技术终归落实到做好的切片上，看看做好的片子就囊括了所有的技术，我继续晒晒做好的切片吧。下一步晒晒脑子的片子。

作者: 九日 时间: 2011-5-16 08:54

我刚为你找到首医刘洋老师的文章，你按照做吧，专家的经验绝对正确，祝你成功！

作者: vitaminpp 时间: 2011-5-16 08:59

你的蜡有没有混的二甲苯过多啊，浸的时候用纯蜡

作者: dingwei 时间: 2011-5-16 09:39

感觉蜡块是处理得还可以，可能与切片时的手势和快慢有关。先放入冷水（或20%酒精），把皱折用镊子展平后，再放入热水，应该可能解决。

作者: llj19971997 时间: 2011-5-16 10:58

谢谢丁老师

作者: 李福 时间: 2011-9-22 19:15

蜡块粗修后放在冰盘上（要有水）冻10分钟左右试试

作者: 肖技师 时间: 2011-9-26 23:14

脱水过程有点问题，80%乙醇后放95%过夜就行了，无水乙醇不适宜过夜。切片时可在47度水里漂长一点时间。

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