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标题: 高碘酸----希夫染色的应用体会（转载节选） [打印本页]

作者: 九日 时间: 2011-5-23 16:05 标题: 高碘酸----希夫染色的应用体会（转载节选）

1 　材料与方法
1. 1 　材料　选自本院病理科活体组织检查标本,将蜡块取2μm 连续切片。
1. 2 　试剂配制　(1) 高碘酸氧化剂:浓度为0. 5 %～1 % ,配制好后用棕色瓶置于4 ℃冰箱保存。(2) Schiff 试剂:取400 mL洁净烧杯1 只,盛蒸馏水100 mL 煮沸,加入碱性品红0. 5 g ,此时溶液为深红色。待冷却至50 ℃时过滤至三角瓶内,加入1mol/ L 盐酸10 mL ,冷却至25 ℃时加入偏重亚硫酸钠0. 7 g ,塞紧瓶口轻摇,使其溶解,将溶液置于室温、暗处24 h。此时溶液呈淡的稻草黄色或淡红色,加入活性炭0. 7 g 搅匀后塞紧瓶口轻摇1～2 min ,静置1～2 h ,过滤至棕色瓶内,此时溶液为无色透明液体,置于4 ℃冰箱内保存。
1. 3 　染色步骤　(1) 切片脱蜡至水; (2) 0. 5 %高碘酸氧化5～8 min ; (3) 流水冲洗2 min ,再用蒸馏水洗; (4) 入无色品红液,于暗处加盖作用10～20 min ; (5) 0. 5 %偏重亚硫酸钠液滴洗2次,每次约1 min ; (6) 流水冲洗5 min ; (7) 亮绿水溶液复染数秒; (8) 稍水洗; (9) 常规脱水、透明、中性树胶封固。
·1. 4 　注意事项
1. 4. 1 　对拟进行糖原染色的标本,用非水溶性固定液进行固定,才能把糖原保存下来,有利于糖原染色。
1. 4. 2 　配制Schiff 试剂时,尽量使用高质量的碱性品红等试剂,配制过程中使用洁净的器皿,避免污染,在配制过程中碱性品红应充分溶解,过滤彻底,留下具有良好性状的碱性品红。
1. 4. 3 　根据是否进行免疫组化和组织化学重复染色,分别使用1 %与0. 5 %的高碘酸进行氧化作用,以达到最佳效果。
1. 4. 4 　染色时,根据试剂配制时间与环境温度,适当调节作用时间,避免污染并避光染色,方可达到理想染色效果。
1. 4. 5 　糖原染色时,应做消化对照。
2 　结　　果
染色结果糖原及其他PAS 阳性物质呈红色,细胞核呈蓝色。
此文转载于《检验医学与临床》2009 年3 月第6 卷第6 期
作者：李剑颖
作者单位：福建省安溪县医院病理科　362400

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