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标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节 [打印本页]

作者: liu-min6309 时间: 2003-7-23 21:11 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节

作者: shanghainese 时间: 2003-7-24 04:33 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

临床病理石蜡切片的淋巴节，一般不会出现细胞核染色模糊。除非福尔马林固定不好时间太短或组织已自溶。另外的ke可能性是切片脱蜡不够或苏木素陈旧了。

作者: frankbj 时间: 2003-7-24 20:32 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

也有可能是透明不好

作者: 姚松涛 时间: 2003-7-25 20:33 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

我感觉淋巴结染色模糊可能是以下原因:1 苏木素染色过深 2分化时间过长而返蓝时间不够 3 脱蜡时间不足 4至于透明时间够否可能也有些原因
以上意见请朋友参考

作者: dingwei 时间: 2003-7-26 11:08 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

有时组织块脱水不佳，会造成组织细胞核模糊，好象有点毛玻璃样的感觉，特别是小标本，我不清楚问题出在什么环节，下面送上来的蜡块有很多这样的，我特意想做成这样的也做不出来。大家想办法解决一下。

作者: 临风揽月 时间: 2003-7-26 11:14 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

同意丁老师的意见。有时候我们的小标本也会出现这样的情况，诊断组总是说我们脱蜡不干净，于是我们加温脱蜡，但是情况还是不能改变，请各位老师指点！

作者: shanghainese 时间: 2003-7-28 03:58 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

很可能是组织没有及时固定，细胞核发生了自溶。这时再固定、染色也不行了，做出
来的片子模糊不清。

作者: liu-min6309 时间: 2003-7-28 19:56 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

谢谢各位的指教。
还有一问题求教：由于医院的医生经常用酒精固定送检标本，此标本如何处理？

作者: shanghainese 时间: 2003-7-29 01:19 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

酒精已固定送检标本，可用福尔马林再固定一下。给医院的医生送福尔马林固定液。

作者: liu-min6309 时间: 2003-7-29 22:06 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

求教：从小医院送来的标本常用95%乙醇固定，在制片过程中发现此组织又硬又脆，制出来的切片镜下观察，其细胞核着色不均（核模糊，似蜡未脱净的感觉，此类切片无论脱蜡多久均无效果）。请问该组织如何修复为好？

作者: shanghainese 时间: 2003-7-29 22:48 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

liu-min6309：
没有看过您的片子很难断定是什么原因。不过我想很可能是固定不好，特别是大块的组织标本。如果是这样，我也想不出办法了。

作者: xangyuu 时间: 2003-8-14 22:16 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

我认为要从几个方面找原因：1、固定。如固定不好，易使细胞自溶有人有时会把配制伏尔马林溶液浓度搞错，应该是每瓶甲醛原液配5000ml伏尔马林溶液。固定时间也不能太短。2、取材及脱水。取材不能取得太厚，太厚脱水容易不充分，脱水冬天的温度不能太低，时间不能太短，最低不能少于小时/道，酒精要注意更换，别太久不换影响质量。3、脱蜡洗蜡。两道二甲苯时间不要低于2分钟/道，后面的两道无水乙醇时间也不能短，且要注意每缸试剂都要满过玻璃片。4、染色。时间要足够长，特别是素木素氧化不太好的时间要更长，必要时可试用加热。5、分化。时间不能太短，太短胞核与胞浆易模糊。6、蓝化（反蓝）。时间要足够长，最好是放在自来水中自然蓝化。7、透明和封片也是很重要的哦！

作者: xangyuu 时间: 2003-8-14 22:20 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

:em03:

作者: xangyuu 时间: 2003-8-14 22:24 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

酒精已固定送检标本，可用福尔马林重新固定一下或给医院的医生送福尔马林固定液。 :em02:

作者: 中威先生 时间: 2003-8-18 13:05 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

不知道您用的是何种固定液固定?
在这里给您推荐用Bouin固定液,此液固定效果好,组织细胞结构完整,细胞核着色鲜明.
配方:饱和苦味酸水溶液:甲醛水溶液:冰醋酸=15:5:1.
如果要求固定的时间短,也可以在上液中加入80的酒精(占容积总量的60%左右)配成混合液.

作者: 王挺 时间: 2003-8-30 18:36 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

一般淋巴细胞苏木素染色时间较短，固定不佳，脱蜡，分化可能存在问题。

作者: 奇刺 时间: 2003-9-5 23:35 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

1、这种情况在夏季很常见，而且多见于一些小门诊手术标本直径在0.5-1cm之间，（非胃镜及子宫刮诊）我曾经认真的追究过原因，发现大多数情况是因为临床医师没有立即固定的意识。他们往往是在手术完成，缝好皮肤打好敷料以后才会送检。而小医院医生手术不熟练，有的门诊手术经常会做一到一个半小时，然后再加上缝皮，包扎的时间，有的医生还要手术做完后跟病人讲解做临床外检的必要性，开处置单，再等待病人交费后固定送检！！这样一来，在室内温度在28—30度（有空调的情况下）经过两个多小时后离体组织才得到固定。如果再加上组织含血丰富或者富含水分，固定液配置后甲醛的挥发（一般小医院手术室都是隔几天才配一次，门诊手术时间就拖得更长），浓度不够，使得有些细胞就产生毛玻璃样改变。

作者: 王建君 时间: 2003-9-8 08:38 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

我曾遇到过这种状况，最后更换脱水剂，效果不错，另我现在用95%酒精及丙酮脱水脱脂，效果不错，制片中经常更换试剂是很重要的，另我们脱蜡一般采取在切片二甲苯中浸30分钟的方法，建议试用。个人体会，不一定正确，欢迎指教。

作者: binma2 时间: 2003-11-23 19:01 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

本人试100%甲醇固定30 微米的淋巴结冰冻切片，染色效果比酒精，福尔马林固定要好。
还可以用ZENKER(一种含汞的固定试剂)，对淋巴结，脾等网状内皮组织固定效果好。

作者: 王挺 时间: 2004-2-15 15:40 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

我个人同意楼上的意见啊。

作者: 王挺 时间: 2004-2-15 15:41 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

还有可能就是片子切的套厚。

作者: yjd 时间: 2004-2-15 18:29 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

淋巴组织一般易变脆变硬，不易切好片，不会出现模糊的现象，所以有可能是组织固定不够或取材时组织太厚或淋巴结的包膜未切开等

作者: ylzhao 时间: 2004-9-1 20:32 标题: 淋巴结制片：为什么细胞核常常模糊？向各位讨教了（用何种液体固定及应注意的细节） (

第一、固定是最重要的，而且不要用酒精做常规固定剂
第二、淋巴结中LN细胞丰富，需要比一般组织更长的分化时间
第三、脱蜡不干净，但是如果你同一组片子中只有LN镜下效果不佳的话应该不是这个
原因
我同意以上三条意见，甲醛固定液对核酸固定效果好，所以乙醇固定不如甲醛好，Zenker液虽然对淋巴结和骨髓固定效果较好，一般不用做常规固定。除了正确选用固定液之外，固定要及时，固定液用量应大于组织体积10—20倍，固定时间要充足。
另外烤片温度不能太高时间太长。长时间高温烤片也会影响细胞着色。

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