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标题: 请教冰冻切片的异常现象 [打印本页]

作者: llj19971997 时间: 2011-11-18 19:44 标题: 请教冰冻切片的异常现象

使用实验材料：大鼠
部位：脑、脊髓
表现：切片很平整，但一贴片就看到在组织上有小泡，这个小泡就是没有贴上载玻片。其他都很好。

但切肠系膜中的脂肪没有这个现象，还有心肌也没有这个现象。

还发现切大鼠脊髓中病变中的没有这个现象，而正常对照却很明显。感觉和组织的特异性有关。是否含脂类的组织容易出现这个问题？那有什么原因，有何理论依据，我该如何解决。

我学切片半年。但我发现有一个老师干了十多年，水平也很高，他贴片的时候也是会出现这个现象。后来他把板洗干净了，但还是不太好。只能贴片的时候吸片，好像能好些。

请大家帮忙解决一下？

作者: ylzhao 时间: 2011-11-20 21:57

有人做冰冻切片，将载玻片预冷后再贴片，不知道你是采用哪种方法。其实预冷后再贴片组织不容易贴牢。也容易留下气泡。你发现的问题也可能与贴片没有任何关系。此乃无的放矢，请多包涵。

作者: 天涯无风 时间: 2011-11-21 12:13

片子太厚了

作者: huage5401 时间: 2011-11-21 13:29 标题: 请教冰冻切片的异常现象

正常现象，因为脑组织大多是固定并脱水后再行冰冻切片，故而贴片容易有气泡。但也有一些办法减少气泡现象，比如贴片的手法，组织固定、脱水完全等等。

作者: 王华 时间: 2011-11-22 21:28 标题: 回复 1# 的帖子

“切片很平整，但一贴片就看到在组织上有小泡，这个小泡就是没有贴上载玻片”
那些小泡应该是在贴片时被“封闭”在组织与玻片之间的空气。
不是所有的组织都会出现这种现象，含“胶样物质”多的组织容易出现这种现象，比如甲状腺等。
一般的组织也会在贴片的过程中“封闭”空气，但因为一般的组织含水分为主，空气被“封闭”之后可以从组织细胞之间的间隙“溜”出去，所以不容易出现空气小泡。
正常的脊髓的质地软而致密，因为脊髓含有大量的磷脂成分，与脂肪不同，磷脂结构是较为致密的， “封闭”空气之后，空气是跑不出去的。病变的脊髓不容易出现小泡，是因为脊髓病变之后出现变性坏死，脊髓的坏死主要是液化性坏死，液化的磷脂结构破坏，就不能“封闭”空气了，所以气泡就少了。

要解决正常脊髓组织出现小泡，我有一个小技巧：贴片时别一下子垂直贴向组织，载玻片与组织呈一点角度慢慢向下贴，让组织从一侧依次贴向玻片，其实就是要达到贴片时将空气赶出去的效果。
但因为每个人的手法会有一点差异，我也不能保证这样操作能绝对杜绝小泡现象，不过应该会有改善的。

个人观点，仅供参考！

作者: llj19971997 时间: 2011-11-23 08:15

谢谢王老师及各位同仁。王老师的解释让我茅塞顿开。这个问题我目前基本解决了，不过王老师的解释让我明白为什么出现这个现象。
虽然现在还不能保证所有的切片都不出泡，但总有了一些改进。方法和各位提到的是一样的，在贴片手法上只能使用王老师提到的手法。

终于完成任务了，谢谢各位的支持

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