标题: 恒温冷冻切片 [打印本页]

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作者: DINGWEI    时间: 2002-1-14 23:38     标题: 恒温冷冻切片

[这个贴子最后由dingwei在 2002/08/08 09:58pm 编辑]

                                       恒温冷冻切片  
将组织在恒温冷冻切片机里切片。冷冻腔内的温度一般设置为-18至-25℃，根据不同组织调节不同的腔温，平时应将冷冻头放置于冷冻台上。冷冻切片机应长期处于恒温冷冻状态。
(1)、当冰冻组织取好后，有速冻开关的机器可先将开关打开，再在冷冻头上放少量的OCT（Optimal cutting temperature solution  是一种多糖物质，为乙二醇和树脂的混合物,）或羧甲基纤维素，也可用普通胶水代替，放上组织，速冻。有条件的单位最好先用液氮冷冻
(2)、待组织冻结后，将冷冻头装到切片机上
(3)、粗切，修出切面细切几张，用毛笔刷去刀上组织片
(4)、放下抗卷板，开始切片，切片厚度一般为5～6微米，切出的片子用载玻片贴附后立即放入(95ML甲醇+5ML冰醋酸）中固定，固定时间为10～20秒
(5)、水洗
(6)、苏木素1分钟
(7)、水洗
(8)、盐酸酒精分化1秒钟
(9)、水洗
(10)、温水蓝化
(11)、伊红2～5秒钟
(12)、梯度酒精快速脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

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