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标题: 关于冰冻切片急！！ [打印本页]

作者: liflit 时间: 2004-1-2 21:27 标题: 关于冰冻切片急！！

本人用冰冻切片机进行切片，组织取材7um，之后进行HE染色，大致过程为mayer液——伊红——剃度酒精——二甲苯，然后在显微镜下观察，开始较好，片之颜色较正常，空气中干燥2min后，镜下迅速变黑，无法辨认细胞。
咋回事！！

作者: shanghainese 时间: 2004-1-3 02:25 标题: 关于冰冻切片急！！

您可能忘了封片吧?

作者: hot天使 时间: 2004-1-3 16:48 标题: 关于冰冻切片急！！

对呀，你有没有封片？

作者: liflit 时间: 2004-1-3 19:31 标题: 关于冰冻切片急！！

[这个贴子最后由liflit在 2004/01/03 07:44pm 编辑]

因为后续实验要从该片上取下所见细胞，所以不能封片，以前有人染过，结果还可以，怎么我染的什么也看不出来。下面是我的染色过程，时间操作的不太严格，影响会很大吗？
100% ethanol - 15 sec
95% ethanol - 15 sec
70% ethanol - 15 sec
Deionized water - 15 sec
Mayer's Hematoxylin - 30 sec
水洗 10 min
Deionized water - rinse (x 2) - 15 sec
70% ethanol - 15 sec
Eosin Y - 5 sec
95% ethanol - 15 sec
95% ethanol - 15 sec
100% ethanol - 15 sec
100% ethanol - 15 sec
Xylenes (to ensure dehydration of the section) - 60 sec
Air-dry for approximately 2 minutes
实际操作中，mayer液时间从大约10秒至30秒均试过，影响不大

作者: shanghainese 时间: 2004-1-4 01:23 标题: 关于冰冻切片急！！

下面是我把您的的染色过程改了一点，请您试试。
100% ethanol - 15 sec
95% ethanol - 15 sec
70% ethanol - 15 sec
Deionized water - 15 sec
Mayer's Hematoxylin - 30 sec
水洗 10 min
Deionized water - rinse (x 2) - 15 sec
70% ethanol - 15 sec
Eosin Y - 5 sec
Deionized water - rinse (x 2) - 15 sec
用甘油或PBS封片。(这是临时性的封片，可以从该片上取下所见细胞。)

作者: liflit 时间: 2004-1-4 23:11 标题: 关于冰冻切片急！！

感谢各位帮助，今天试过好多了

作者: 〖非我莫属〗 时间: 2004-1-10 12:49 标题: 关于冰冻切片急！！

其实染色没什么关系，还是封片的原因，同意用缓冲甘油先封片！

作者: yjd 时间: 2004-2-17 20:07 标题: 关于冰冻切片急！！

楼主及楼上的现象及方法非常好，这提示我们病理技术人员的工作责任心是非常重要的，特别是出现的问题要从常规理论上找原因。

作者: 葵花 时间: 2004-3-17 20:23 标题: 关于冰冻切片急！！

缓冲甘油土封片是怎样的处理方法

作者: 海燕 时间: 2004-3-18 10:40 标题: 关于冰冻切片急！！

请问：
你所使用的冰冻切片机是何种型号？效果如何？huifu :fhy1975@163.com

作者: 海燕 时间: 2004-3-24 23:26 标题: 关于冰冻切片急！！

你用何种切片机？效果如何？

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