中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 冰冻切片的注意事项: [打印本页]

作者: DINGWEI 时间: 2002-1-14 23:39 标题: 冰冻切片的注意事项:

冰冻切片的注意事项:
(1) 速冻：是冰冻切片的关键，因为只有速冻才能减少组织内的冰晶，最好的办法是将速冻头压在组织上，冻好后就可切片。特别适用于较脆的组织。而含有脂肪较多的组织，最放放在液氮里处理。在液氮里冷冻要注意不要冻过头，2～3秒钟就要拿出来看一下，只要有4/5的组织已经冻住就可以了，待冷冻头拿出后刚好全部冻住，否则就会引起组织发脆，或冷冻头与组织分离。
(2)固定：切片后应立即放入甲醇中固定，不能等切片干后再固定，后者容易造成细胞退变。固定液有很多种，根据我们的实践，认为甲醇作用快，收缩小，染色较清晰，是冰冻切片最理想的固定液。
(3)包埋剂：可用普通胶水代替，但要加入适量的水（胶水与水的比例大约在2：1左右）。太稀了，容易损伤切片刀；太稠了，粘在切片上不容易洗掉,影响切片的质量。
(4)冰冻用切片刀不仅要磨的快，而且要磨的直，否则切出的片子就不会平整,不能进入抗卷板。最好能使用一次性刀片。
(5)如组织发脆，可等几分钟后再切，也可用手在组织上稍稍加温；如果用手去摸组织块，最好戴手套，或用玻片间的纸夹在手与组织之间，以防感染。
(6)冷冻室的温度冬天一般设在-19℃左右，夏天设在-22℃左右。不同的组织,有不同的温度要求:肝脏、甲状腺组织温度控制在-15℃左右，脂肪组织一般在-35℃以下。
(7) 冷冻切片机应长期处于恒温冷冻状态，经常的开关机器电源容易造成压缩机损伤。

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)