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标题: 请教肾穿荧光掉片问题 [打印本页]

作者: 新手妈妈    时间: 2012-3-3 00:24     标题: 请教肾穿荧光掉片问题

最近两次做的肾穿荧光,总是存在肾小球掉出来或是不见了的情况,不知道有哪位老师可以帮忙分析一下原因~
步骤如下:
3微米冰冻切片,一张片上切2张组织,放入-24度冰箱冷冻1-2小时,取出,吹风机冷风吹5-10分钟,蒸馏水洗3次,每次3-5分钟,加抗体,室温过夜,蒸馏水洗3次,每次3-5分钟,荧光显微镜观察。
一直都是这样做的,以前没有这种情况,最近2次掉片挺严重的,每次都有重做的项目,谢谢各位了~
作者: 悠悠我心    时间: 2012-3-6 19:01

是否近期的防脱片质量不行?
作者: 麻帅    时间: 2012-3-6 19:32

冰冻切片不用防脱处理 看看固定组织的甲基纤维或胶是否冰冻过度 还有做免疫荧光 切好片自然干燥 30分钟就能做好 你的方法好麻烦




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