中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 介绍一种简便快捷的髓鞘染色法 [打印本页]

作者: 九日 时间: 2012-4-25 16:39 标题: 介绍一种简便快捷的髓鞘染色法

　　经典的髓鞘染色方法所需时间长、易脱片且难于掌握。笔者通过反复摸索,发现利用超声波进行髓鞘染色能克服上
述缺点,获满意结果,现介绍如下。
1
　材料与方法
1.1
　材料　取外周坐骨神经和尸检大脑组织各5例。所有组织均经10 %福尔马林液固定,常规石蜡包埋;在AO切片
机上切取5μm厚连续切片,于65℃烤箱烘烤4 h备用。所有试剂配制均参考凌启波〔1〕的方法进行。采用江苏常州中
威电子有限公司生产的DCSK2多功能超声波组织处理仪。1.2　方法　切片常规脱蜡至水 →3 %重铬酸钾中
于超声波组织处理仪处理(76℃)10 min→蒸馏水洗2×1 min→4 %硫酸铁铵媒染液中,于组织处理仪处理(76℃)
30 min→蒸馏水洗后,切片入碳酸锂苏木精,在超声波组织处理仪中染色(76℃)10 min→自来水清洗2×5 min→
4 %硫酸铁铵分化(镜下控制) 至背景呈淡黄色,髓鞘深蓝色 →自来水清洗后,Loyez分化液中分化2 min ,流水洗
2 min→脱水、透明、封片。1.3　对照　采用凌启波〔1〕介绍的经典碳酸锂苏木精染色法和郑辉〔2〕
报道的微波染色法作对照。
2　结果
髓鞘呈深蓝色,背景为极浅的淡黄色。坐骨神经髓鞘环绕神经轴索外周,纵切面呈藕节状,横切面为小圆圈状 (图
1) ;脑组织中髓鞘呈深蓝色,神经轴突不着色(图2)。
3
　讨论
经典碳酸锂苏木精染色法的主要缺陷是染色时间长和易脱片〔1 ,2〕。郑辉等
〔2〕利用粘附剂贴片,主要染色步骤采用微波处理,虽然可完全解决脱片问题,但微波处理过程中,试剂容易挥发,
消耗大,而且基层病理科并非均有微波炉,故推广可能受到某些限制。我们利用超声波组织处理仪进行髓鞘染色
,对切片没有任何要求,即一般的蛋白甘油粘附的石蜡切片亦未发现脱片现象,整个染色过程在1
.5 h完成,而且超声波组织处理仪是基层病理科的常规设备,故利用超声波组织处理仪进行髓鞘染色特别适用基层病理科的临床病
理诊断,值得推广。　　根据笔者的经验,切片不宜太薄,否则髓鞘着色浅影响观察,我们认为切片厚度以5μm比较合适。此外,
在染色操作中,碳酸锂苏木精的染色可适当偏深,这样使分化容易控制,获得满意结果。
参考文献
1
　凌启波1实用病理特殊染色和组化技术1广州:广东高等教育出版社,1989 :158～161
2
　郑　辉1微波技术在髓鞘染色中的应用1临床与实验病理学杂志,1999 ;15 (2) :182

本文转载于《临床与实验病理学杂志》2000Apr：16（2）
作者：张革进陈晨
作者单位：湖南医科大学病理学教研室,长沙　410078

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)