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标题: 现代病理学技术条件下特殊染色的应用价值 [打印本页]
作者: 九日    时间: 2012-9-11 23:34     标题: 现代病理学技术条件下特殊染色的应用价值

现代病理学技术条件下特殊染色的应用价值

四川省人民医院（610072） 胥维勇

特殊染色是最基本的组织化学染色技术，属传统病理学
技术范畴，从19 世纪中期至20 世纪70 年代末期有很大的
发展，近30 年来特殊染色方法变化不大。大部分特殊染色被
其他相关染色技术所替代，但仍有些染色方法在原来基础上
经不断改良和创新，并与病理学新理论、新技术相融合而日
趋完善，逐渐形成其他技术难以替代的染色方法。无论现代
病理学技术发展和应用程度如何，特殊染色技术仍然占有重
要的地位。目前病理实验室最常用的特殊染色有以下几种。
1 结缔组织染色
1.1 胶原纤维：是含量最多的纤维，由胶原原纤维集合成束
而成，主要为Ⅰ、Ⅳ型胶原纤维，常用Masson 染色来显示肾小
球基底膜，胶原纤维呈蓝色。
1.2 网状纤维：是Ⅲ型胶原纤维与嗜银蛋白多糖结合的产
物。可由纤维母细胞、纤维细胞、血管外膜细胞等间叶细胞及
间叶性肿瘤细胞产生。多采用Gordon-sweet 染色法，网状纤维
染色应用十分广泛。
1.3 弹力纤维：由集合成束的弹力微纤维和均质状弹力蛋白
组成，可用Vitoria blue 染色法，在皮肤弹力纤维瘤和显示肺
泡结构方面有意义。
1.4 肌纤维：包括骨骼肌、心肌和平滑肌，常用Path 法来显
示骨骼肌和心肌中的横纹。
2 病原菌染色
2.1 幽门螺杆菌
通过胃镜活检标本进行快速尿素酶试验和病理组织切
片染色检测，是诊断幽门螺杆菌感染最常用的检查方法。染
色方法有Warthin-Starry 银染色、Giemsa、亚甲蓝、碱性品红、
石碳酸复红、中性红、甲苯胺蓝、甲基紫、甲苯酚紫和吖啶橙
染色等。
2.2 抗酸菌
2.2.1 结核杆菌：形态上有凝固性坏死或结核样结节病变时
作抗酸染色。
2.2.2 麻风杆菌：瘤型麻风和界限类麻风病灶里均有大量麻
风杆菌存在，怀疑麻风时要作抗酸染色。染色方法有Ziehl
Neelsen 和Wade-Fite 法。
2.3 真菌
染色方法有阿新蓝（AB）、黏液胭脂红（MCS）、高碘酸无
色品红（PAS）和六胺银（GMS）等。PAS 法可显示大多数真菌，
GMS 法显示曲菌、念株菌和放线菌有最佳效果，AB 和MCS
法常用于显示新型隐球菌。
2.4 汉森巴尔通体
由汉森巴尔通体（Bartonella henselae）感染引起淋巴结坏
死性肉芽肿性炎，并有微脓肿形成的病变。猫和人的共患性
疾病。染色方法采用Warthin-Starry 银染色。
3 病理性沉着物染色
3.1 纤维素：采用Ptah 染色用于播散性小血管内凝血的鉴
别。
3.2 含铁血黄素：用Prussian blue 或Schmeltzer 铁染色常用
于骨髓活检组织。可显示细胞内、外铁含量，分别反映骨髓中
铁含量和可用铁量，以区分缺铁性贫血和非缺铁性的铁粒幼
红细胞性贫血。
3.3 淀粉样蛋白：染色方法有结晶紫、刚果红、甲基紫、阿新
蓝、PAS、甲苯胺蓝、硫代黄素T 等染色方法分别在普通光学、
偏振光、荧光显微镜下对染色结果进行分析判断。
4 糖类染色
4.1 糖原：主要在肝和骨骼肌合成，在糖原累积病、糖尿病时
在心肌、肝、肾等均有大量糖原沉积。染色方法有PAS、Best 胭
脂红。
4.2 黏液物质：正常黏膜上皮细胞能分泌黏液，黏液分中性
黏液和酸性黏液，可采用PAS、AB-PAS、AB（pH1.0、pH2.5）等
不同染色来显示。在区别胃黏膜肠腺化生和判断胃黏膜病变
组织中的空泡是印戒细胞还是脂肪空泡，以及在显示肿瘤间
质黏液成分时有意义。
4.3 基底膜：由Ⅳ型胶原蛋白和层粘连蛋白组成，为一层高
度含水性胶体的被膜，表面为蛋白多糖。在肾脏穿刺标本检查
时，观察肾小球基底膜变化，常用PAM 染色来显示。
5 肥大细胞染色
肥大细胞是一种恒定的结缔组织成分，胞质内充满了粗
大的嗜碱性颗粒，分成熟（肝素）和幼稚（组胺）颗粒。在一些肿
瘤间质中肥大细胞数量明显增多，肥大细胞脱颗粒的降解产
物有抗肿瘤作用。染色方法有甲苯胺蓝、Giemsa、苏木素-中性
红、醛品红-橙黄G、硫堇、天青A、焦油紫等。
6 神经髓鞘染色
任何因素引起的神经纤维损伤均可导致髓鞘的变性和脱
失。根据正常和不同病变髓鞘的组织结构特点，观察正常和病
理情况下髓鞘是否完整，有无变性、脱失、坏死及修复情况。髓
鞘染色方法有：
6.1 组织切片染色法：如Loyez 碳酸锂苏木精法、Weil 铁明
矾苏木精法、Loxol 坚牢蓝甲苯酚紫法和Page 搔洛铬花青R
法。
6.2 组织浸渍染色法：如Marchi 锇酸染色法、Weigert 铁苏木
精法和Kuleschitzky 苏木精法。
7 脂类物质染色
脂质包括脂肪和类脂，根据其化学结构分为3 种类型：简
单脂质、复合脂质和衍生脂质。
在心、肝、肾等实质器官发生脂肪变性，在胞质内出现大
小不等的空泡时，用于区分是脂肪变性或水样变性或糖原贮
留。在动脉粥样硬化时，内皮细胞下的脂质沉着时能将脂质
清晰地显示出来。由脂肪组织病变所引起脂肪栓塞时显示栓
子内的脂质。
染色方法采用苏丹Ⅲ、Ⅳ（Sudan Ⅲ、Ⅳ）、苏丹黑B（Sudan
black B）和油红O（Oilred O）、尼罗蓝（Nnile blue）等。脂溶
性染料大部分为偶氮染料，脂溶性染料对脂肪的染色是一种
物理性的溶解作用或吸附作用，即脂溶性染料溶于脂肪或被
脂肪所吸附而显色。
8 核酸染色
8.1 Feulgen 反应：DNA 呈紫红色，胞质和其他组织成分呈绿
色。对胞核DNA 定量分析有意义。
8.2 甲基绿-派洛宁染色：胞质和核仁内的RNA 呈红紫色，
胞核染色质内的DNA 呈绿色或绿蓝色。
8.3 核仁形成区：采用AgNORs 染色，判断细胞增殖状态，在
鉴别良、恶性肿瘤研究时有意义。
每种特殊染色都有自己的原理、方法、注意事项和应用范
围。所使用的染料也不同，染料具有较高的特异性和敏感性，
能显示组织和细胞及间质中不同成分，形成各自独立的染色
方法和操作步骤，能使所要显示的成分呈现出不同的色泽，颜
色鲜明绚丽。特殊染色试剂配制和染色步骤比较繁琐，工作
中要注意收集资料，通过实践去认识它、掌握它，并结合实验
室条件选择经典方法，掌握各种干扰因素对影响染色质量的
排除方法，以便应用和推广，使特殊染色的优越性充分体现出
来。
自从免疫组织化学问世以后，组织和细胞中大部分化学
成分及一些反应基团都可以采用免疫组织化学方法检测，特
殊染色的许多方法被免疫组织化学染色所替代。但特殊染色
具有定性准确、方法简单、结果可靠的特点，在对一些非肿瘤
性疾病和科研工作中作对比观察起相互印证作用。

文章转载于《实用医技杂志》2012 年3 月第19 卷第3 期
作者: 九日    时间: 2012-9-11 23:41

听听专家的话，多么有道理



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