中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 一个可能很简单的HP染色问题 [打印本页]

作者: smileaaa 时间: 2014-9-9 20:19 标题: 一个可能很简单的HP染色问题

不知道各位同行是用什么方法染HP的？
最近一个月，我们的HP染色出现了问题，我们使用的是吉姆萨染色，胃镜固定液是95%酒精，常规脱水（脱水第一步，不使用福尔马林，直接低浓度酒精！），常规脱蜡，水洗进染料。
问题出现：  吉姆萨染色，染出来片子很淡，颜色上不去，染久了又泛红，幽门螺杆菌在强阳性下，依稀可见。

探索过程：  吉姆萨试剂最近一个月，更换了产品（老的叫“吉氏”，两者分子式不同），余下的吉姆萨试剂已过期，试了之后还是一样淡。

更换染色方法：  使用亚甲蓝染色，亚甲蓝硼酸染色，厂家试剂，均未见好转！期间都使用全新脱蜡试剂，脱蜡水洗绝对能保障！

奇迹出现：更换福尔马林固定后，染色奇迹般的上去了（无论用啥方法），不但时间缩短了，而且背景也干净了，幽门螺杆菌一条条杆状，历历在目！

再进谜团：同张胃镜片子，在福尔马林固定后，HE染色出现问题，背景陈旧性，在胃组织周围一圈，出现淡黄色，颗粒状物，疑似色素沉着？！

提出问题：1，胃镜能否用95%酒精固定，对HP染色是否存在影响？
               2，福尔马林固定后为啥出现这种情况？（在进脱水机之前，没有水洗，可是大标本也没洗呀？它怎么没有这种问题）
求论坛内大神们指点迷津，给个建议！

作者: zhww626090 时间: 2014-12-17 20:40 标题: 回复

胃镜组织最好不用95％酒精固定，可选用95％酒精85ml十10ml甲醛十5ml冰乙酸或95％酒精90ml十10ml甲醛，最好用10％中性甲醛固定

作者: dingwei 时间: 2014-12-18 07:35

用10％中性福马林固定

作者: histotechnology 时间: 2014-12-19 08:14 标题: 回复 1# 的帖子

用95%的酒精固定，在低浓度酒精脱水，不会又问题吗？

作者: dingwei 时间: 2014-12-19 16:53

95%的酒精固定，本身就有问题。酒精只是在没有固定液的情况下才作为替代品，规范要求是10%中性福马林。95%酒精会使蛋白质凝固，使酒精无法渗透到组织深部。脱水再从低浓度开始，已经没有意义。

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)