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标题: 请教;我有一个笨笨的问题 [打印本页]

作者: verysale    时间: 2003-5-10 22:24     标题: 请教;我有一个笨笨的问题

关于在免疫组化中,用1%过氧化氢处理切片以阻断内源性过氧化物酶的问题,我有点闹不懂:酶的特点就是在化学反应前后质量不发生改变,那么就算用 1%过氧化氢处理切片,也不能使组织切片上的 内源性过氧化物酶 消失 。而且只要将这些加入的1%过氧化氢催化之后, 内源性过氧化物酶仍然可以作用于加入的DAB(供氢体)呀,郁闷。
作者: zhtp2003    时间: 2003-5-20 10:19     标题: 请教;我有一个笨笨的问题

问得好!我也有这种想法!
作者: lumangmang    时间: 2003-8-4 19:22     标题: 请教;我有一个笨笨的问题

问得好!我也有这种想法 ,请各位高手不吝赐教

作者: pathypmh    时间: 2003-8-6 20:51     标题: 请教;我有一个笨笨的问题

这是用高浓度的过氧化氢封闭内源性过氧化物酶和假过氧化物酶反应(如含血组织)
一般用1%-3%的浓度,还有0.5%甲醇-过氧化氢的说法,不过后者代价太高,另外也有毒性。我用这个是进行冰冻切片的免疫组化的,即固定又抑制内源性过氧化物酶
作者: binma2    时间: 2003-11-24 00:35     标题: 请教;我有一个笨笨的问题

过氧化氢和内源性酶结合了,酶的结合位点被饱和了。
作者: fangdang    时间: 2003-11-26 14:46     标题: 请教;我有一个笨笨的问题

过氧化氢和内源性酶结合了,酶的活性被灭活.DAB中含有过氧化氢.若不进行此步骤. 就回产生非特异染色.证明(用富含红细胞的片子不加A液和一抗直接加DAB也会被染色)而正常的染色步骤中的DAB 的供氢体为streptavidin-peroxidase(链霉菌抗生物素--过氧化酶)俗称2抗提供.从而减少非提议染色.





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