在免疫组织化学染色中，冰冻切片是被研究人员使用最多的一种切片方法。原因是这种切片方式能够较完好地保存各种抗原的免疫活性及酶类，特别是对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶保存；而且对组织存储的形态没有限制，新鲜组织和已固定的组织都可使用冰冻切片。

然而在使用冰冻切片时，组织中的水分易形成冰晶，特别是在含水量较多的组织中更容易发生。严重的冰晶状况（如小而多），会刺破细胞，破坏组织形态，影响抗原定位。

冰晶是如何形成的呢?

然而在使用冰冻切片时，组织中的水分易形成冰晶，特别是在含水量较多的组织中更容易发生。严重的冰晶状况（如小而多），会刺破细胞，破坏组织形态，影响抗原定位。

如何解决冰晶问题，提高切片质量？

可采取速冻措施减少冰晶的形成，使组织温度骤降，缩短温度下降（-33℃~ -43℃）所需时间，从而减少冰晶的形成。目前已知的方法有：

1.
使用液氮；这种可快速冷冻组织，有效减少冰晶形成。但因技术成本和管理成本高，使用过程安全性不高，存在生物安全问题等因素，没有被广泛运用。

2.
采用半导体制冷技术；瑞沃德Minux®智能恒温冷冻切片机使用该技术，一键启动快冷模式，设备自动开启固定吸热块，可在1-3分钟内把温度降至-55℃~-60℃。

*注意：

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OCT包埋剂影响组织冷冻速度，使用须适量。

·
冷冻过组织的固定式吸热块，必须放在速冻台上再次降温后使用。

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可将组织置于20%、30%蔗糖溶液梯度脱水，利用高渗吸收组织中水分，减少组织含水量。