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标题: Feulgen染色细胞核不着色，请教大家，有没有秘诀？ [打印本页]

作者: Chitty 时间: 2004-12-2 21:16 标题: Feulgen染色细胞核不着色，请教大家，有没有秘诀？

Feulgen染色
1、用木制压舌板刮粘膜涂片，自然干燥；
2、甲醇：冰醋酸（3:1）固定15分钟，自然干燥；（15~20分钟）
3、冷1N HCl 浸洗1分钟；
4、60 oC 1N HCl水解10分钟；
5、冷1N HCl浸洗1分钟，蒸馏水漂洗3~4遍；
6、移至Schiff试剂内60-90分钟；（玫瑰红色）
7、（移至3杯的第一杯亚硫酸漂洗液内1分钟，移至第2，3杯内各2分钟。）（可做可不做）。蒸馏水充分漂洗；
8、用1%淡绿水溶液染45秒。
Result: 核为红色，胞浆为绿色。
我严格按这方法作的，可是细胞核就是不着色，课题马上要开始了，我的实验方法还没有摸索好，怎么办呀？
众位朋友，谁做过特殊染色的，能不能指条明路。
谢谢，谢谢！

作者: ylzhao 时间: 2004-12-4 09:47 标题: Feulgen染色细胞核不着色，请教大家，有没有秘诀？

Feulgen染色成功与否，一是选择恰当的固定液；二是不同的固定液有不同的水解时间，水解不能过度；三是Schiff'试剂不能失效，一般推荐放置暗染色。讲的比较详细的是人民卫生出版社贲长恩李叔庚主编的“组织化学”你可以参考一下该书。

作者: dingwei 时间: 2004-12-5 13:09 标题: Feulgen染色细胞核不着色，请教大家，有没有秘诀？

最关键的是60 oC 1N HCl要预热。只有1N HCl内的温度真正达到60 oC ，DNA链才会水解。

作者: Chitty 时间: 2004-12-5 22:03 标题: Feulgen染色细胞核不着色，请教大家，有没有秘诀？

事实证明你说的是对的

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