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标题: 血性胸腹水涂片制作技术的探讨 [打印本页]
作者: dingwei    时间: 2001-7-7 07:30     标题: 血性胸腹水涂片制作技术的探讨

                   血性胸腹水涂片制作技术的探讨
梁惠珍  吴惠茵
    在胸腔水细胞涂片制作中，尤其是血性胸腹水涂片作HE染色后，镜下可见较多的红细胞，背景深染成红色；给查找癌细胞造成一定的困难。一些作者用低渗液或其它化学试剂加入胸腹水中，以达到消除红细胞的目的，这些方法虽然去除了红细胞，背景染色清晰，但却使其它细胞形态有所改变，尤其是癌细胞的结构不够清晰，给诊断造成困难。为探讨一种较理想的血性胸腔水涂片制作方法，我们做了以下实验。
1  材料与方法
    收到送检的血性胸腹水后立即分别作如下处理：①离心后加生理盐水洗；②加入等量的10％福尔马林；③加入等量的50％乙醇；④不加任何试剂；分别摇匀混合后作2000r／min离心10min，倾去上清液，将沉渣作涂片，待半干时入乙醚乙醇(1：1)固定，经固定的涂片稍水洗后作常规HE染色。
2  结果与体会
    4种不同处理的血性胸腹水细胞经HE染色后，结果见表l。
    制作血性胸腹水涂片时，既要避免太多的红细胞背景影响对癌细胞的观察，又要避免完全去除红细胞而造成人为掩盖了胸腹水的血性特点，以利于细胞学诊断。为此，我们对标本做了4种不同方法的处理，并进行比较。
    表1        4种不同处理胸腹水细胞HE染色结果
   生理盐水       癌细胞核谈，胞浆膨胀，可见红细胞，背景淡染
10％福尔马林    癌细胞核染色较深，核染色质不清，细胞有收缩，有红细胞背景
  50％乙醇        各种细胞完整不变形，核染色质清晰，红细胞几乎消失，背景淡红
  不加试剂  细胞完整不变形，核染色好，有红细胞，背景较红
结果显示：50％乙醇处理的血性胸腹水，细胞保存完整，不变形，核染色质清，背景清晰，红细胞消失或谈染。由于50％乙醇与胸腹水液体混合后，低渗酒精可使大部分红细胞迅速溶解，红细胞破裂溶解释出血红蛋白，经伊红染色后背景呈谈红色，从而可判断是否血性胸腔水。
此外乙醇对癌细胞具有固定作用，能使癌细胞染色清晰，结构完整。特别是人手少，标本多的病理室，加入50％乙醇的血性胸腹水如来不及离心涂片，可置于4℃冰箱保存数小时后再制片，不会影响其细胞结构及染色效果。我们认为，用50％乙醇对血性胸腹水进行处理，可制出较满意的细胞涂片，给病理诊断带来很大的帮助。
                摘自：临床与实验病理学杂志 1999年10月第15卷第5 期 466页
作者: 白雪    时间: 2006-12-15 23:03

这么好的经验性的帖子没人看?
现在还有一种做法:如果沉淀物很多,可以包埋后做细胞蜡块.
作者: 小医    时间: 2007-1-4 20:55

新人,早看了这个帖子了,但那会没回贴现在补上可以不.
作者: 寸草心    时间: 2007-1-12 19:06

好方法,立等可试.谢谢.
作者: 枯木寒泉    时间: 2007-4-10 17:34

真是谢谢丁老师了,找好久了.
作者: 1980qiaoliang    时间: 2007-4-10 22:04

为啥不早点加入病理网呢，谢谢了我下去用这办法看看，我们为次想了好几种办法就是没奏效
作者: cheng36175    时间: 2007-7-16 15:29

丁老师,我们用的新柏氏的"大红"液体,操作方法与宫颈涂片处理的方法一样,不知道可不可行,没有进行过对比.您的方法下次去试下,谢谢,丁老师.
作者: 风的影子60    时间: 2007-12-16 13:40

顶<白雪>现在还有一种做法:如果沉淀物很多,可以包埋后做细胞蜡块.
作者: liping.wang    时间: 2008-2-2 16:47

很好的方法，下次试试看效果哦....
作者: 江边观潮人    时间: 2008-2-12 00:45

引用:
原帖由 阿琳870 于 2007-6-12 21:35 发表
解决了一大难题。谢谢！
作者: sixflag123    时间: 2008-3-10 23:33

帖子是不错的，我还有一个比较老问题请教下大。
问题：    大家都怎么防止胸、腹水涂片掉片。
特别是那种胶元比较多的时候，当片子染完苏木素后进入氨水返蓝的时候容易出现掉片情况。
作者: bagelo    时间: 2008-3-11 11:23

学习了
作者: 红玉    时间: 2008-3-13 21:55

标本离心后,涂片,放入0.5%的盐酸数秒立刻取出,再进行固定,后开始染色.结果也不错无红细胞,染色也比较清楚.
作者: ma375640711    时间: 2008-3-13 22:21

好方法!!!        学习了!!!
作者: xiaoniou    时间: 2008-7-29 20:57

请教前辈如果是血性胸水要制成细胞块呢?该杂办?
作者: 淡若水    时间: 2008-8-22 19:53

有个问题想请教，这个等量的50％的酒精，是对那个量来说的？是离心前，还是离心后？最理想的是红细胞溶解后，离心时，血红蛋白不与其他成分一起沉底才好，这样底部就可以富集到包括肿瘤细胞在内的红细胞以外的细胞了。
关于掉片的问题，我过去是用的在玻片上预先尽量均匀的涂抹一薄层甘油蛋白，现在我喜欢涂普通的乳白胶，效果更好。虽然片子有点红，但是细胞不容易掉，也不影响阅片。
我自己的经验是，氨水返蓝容易掉片，特别是石蜡切片。不过前两天也有朋友说，他们用氨水返蓝没有这样的现象。
至于“血性胸水要制成细胞块”，很简单啊，将离心沉淀得到的糊状物，用吸管吸出来，放在薄的小方纸片上（也可以用拭镜纸），包上，直接和别的组织一起制片就行了。
作者: lijie208239    时间: 2008-12-24 19:32

学习了
作者: lijie208239    时间: 2009-1-30 17:54

值得学习 了
作者: dq17529    时间: 2009-3-7 21:48

谢谢了，这解决了我们一大难题啊
作者: 詹晓芬1    时间: 2009-5-17 22:43

这个办法我还没尝试，很好啊，我会试试的，谢谢啊！！因为血性胸腹水确实对诊断影响太大！！
    我对血性胸腹水是这样处理的：揺匀标本，离心（2000r/min）10mins,吸去上清液，可见交界面（上清液与血液），通常为白色，均匀吸取这一层，尽量避免吸取下面的血水，然后涂片。觉得还行啊！
     不过看到这个经验，更好啊！！！我会在科室上用的，谢谢啊 ！！！
作者: 詹晓芬1    时间: 2009-5-17 22:46

血性胸腹水制蜡块，我看过书，需要凝血酶啊，或是血清把它凝结，才好啊！！后就脱水啊！！哈哈哈，书这样说啊，平时比较忙也没时间尝试！
作者: 詹晓芬1    时间: 2009-5-18 21:40     标题: 回复 18# 的帖子

标本离心后,涂片,放入0.5%的盐酸数秒立刻取出,再进行固定,后开始染色.结果也不错无红细胞,染色也比较清楚.
红玉，你这个方法很简单，我会试试看，我觉得应该不错，很不错的办法！！谢谢啊

[ 本帖最后由 詹晓芬1 于 2009-5-18 21:43 编辑 ]
作者: 格言    时间: 2009-5-29 11:54

好帖，学习了
作者: rawuduo    时间: 2009-6-22 21:05

好！支持
作者: 0159lqs    时间: 2009-7-24 12:37

谢谢！
作者: guo_xiao9    时间: 2009-9-1 14:01     标题: 回复 27# 的帖子

这位老师的方法觉得很好，我也要试一下！多谢啦！
作者: WU50770812    时间: 2011-5-24 22:42

我想请问一下，是把50%的酒精直接放入胸水中还是用50%的酒精离心呢？如果是直接放入，那它们的比例应该是多少呢？放多了会不会有影响？
作者: WU50770812    时间: 2011-5-24 22:42

我想请问一下，是把50%的酒精直接放入胸水中还是用50%的酒精离心呢？如果是直接放入，那它们的比例应该是多少呢？放多了会不会有影响？
作者: yzx501699385    时间: 2011-7-31 20:55

去试试了。。。刚开始做胸水涂片 还不怎么会~~
作者: 梅花    时间: 2011-8-1 22:12

谢谢丁老师的好贴，我也一定去试试，另外还要问下各位，沉渣多的血性胸水未加任何试剂制成蜡块后切片，片上除了很多癌细胞外还有非常多红细胞，要做免疫组化能做得清楚吗？有什么方法去除。
作者: zenglihua    时间: 2011-11-30 19:26

学习了
作者: dahhs    时间: 2011-12-1 15:34

没有甩片机的时候,胸腹水的细胞比较少的情况下,可以放在Agarose中，进行脱水制片，也比较好
作者: wxm1117    时间: 2012-1-9 23:46

顶一个。好
作者: water2808    时间: 2017-3-19 01:56

新到的，学习了
作者: water2808    时间: 2017-3-19 01:56

新到的，学习了
作者: water2808    时间: 2017-3-19 01:57

新到的。学习了
作者: water2808    时间: 2017-3-19 01:57

新到的。学习了
作者: water2808    时间: 2017-3-19 01:57

新到的。学习了
作者: guoshan    时间: 2017-5-26 10:34

谢谢丁老师推荐的好文章,建议诸位同仁如有精彩的文章也贡献出来让大家资源共享.
作者: sunnywjingjing    时间: 2018-3-23 11:17

作者: 黑龙江羔羊    时间: 2018-5-9 09:01

谢谢老师
作者: 赵航彬    时间: 2021-3-16 15:04

老师，就想问一下，科室做涂片固定用的是95%乙醇，对这个方法有没有影响，还是说必须用乙醇乙醚试剂。
作者: 学它    时间: 2021-4-21 08:21     标题: 特别好，试过了。

刚接触病理技术五个月，好多技术都不懂，感谢找到这个方法，对于我们制作血性胸腹水涂片及细胞蜡块的帮助很大，谢谢老师的分享。
作者: q567800    时间: 2021-4-21 20:28

谢谢老师
作者: dingwei    时间: 2021-10-10 15:47

轻意不要用破红方法，对细胞形态有影响，采用反复离心法会更好。
作者: xq199479    时间: 2024-9-23 16:12

我们科每次都是加液基细胞学制片用的细胞保存液



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