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标题: HE染色求助 [打印本页]

作者: zhba0918 时间: 2006-11-25 15:39 标题: HE染色求助

我做的大鼠睾丸的冷冻切片HE染色,但是细胞核不能着色显蓝是什么原因?
下面是我的染色参数,望各位大师指点不足!

   (8）蒸馏水                                        片刻
（9）苏木素液染核                                  10—15分钟
（10）自来水洗                                     片刻
（11）1%盐酸酒精分化                               0.5—1分钟
（12）流水冲洗                                     片刻至数小时
（13）碳酸锂饱和水溶液反蓝                         1分钟
（14）流水冲洗                                     15分钟至数小时
（15）复染 0．5％伊红水溶液（对比染色）             2—5分钟
（16）自来水洗（分化伊红）                         片刻

作者: folksmile 时间: 2006-11-25 18:26 标题: RE: 细胞核不着色

老兄，你碳酸锂饱和水溶液反蓝后是蓝的吗？

作者: ls168520 时间: 2006-11-26 15:40

（10）自来水洗片刻
片刻是什么概念？要知道自来水洗的目的是把多余的苏木素洗掉就行了，要是洗的时间长的话都蓝化了，在分化以后蓝化还能蓝吗？

作者: zhba0918 时间: 2006-11-27 15:50

我就是不分化，直接反蓝，还是不会出现蓝色。是不是我得染色液有问题？还是我固定剂有问题（4％多聚甲醛）？

作者: g_xaxia 时间: 2006-11-28 13:55

HE染色，伊红染后，还需要用水冲洗吗？？？
我们是直接转到95％乙醇中

作者: xhw2tl 时间: 2006-12-18 09:05

1%盐酸酒精分化时间有一些长，是不是5--6秒就可以了？

一般最好进去马上就出来，直接水洗

作者: dingwei 时间: 2006-12-18 15:39

分化只是要将细胞浆内苏木素染料和核上过深的苏木素染料去除。
苏木素染好后核是红棕色。碰到酸后也是红棕色。
蓝化是将核上苏木素红棕色的颜色变成蓝色。
分化与不分化的苏木素都要蓝化。
蓝化以后还可以再分化。分化的时间长短应镜下观察，就是显微镜下控制苏木素的深浅，可以反复多次重复分化过程。
如果不会蓝化，主要是苏木素不能用了。也有的是固定液PH值的原因。还有固定不好脱水不好也会使细胞发灰。

作者: hakase 时间: 2006-12-26 18:13

估计是你的苏木素染液配得不好，我的配方染出来的张张清楚，而且苏木素最多染5分钟，自来水洗去多余染液后，流水冲洗10分钟，再用伊红染2分钟，流水洗去附着的染液，然后脱水就成了，从来没有失败过。有时还嫌苏木素染得深了呢。
从来没用过碳酸锂饱和水溶液反蓝，也没用过盐酸呵。

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