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标题: 请教兔耳组织如何脱水、透明和包埋？ [打印本页]

作者: hakase 时间: 2006-12-25 10:35 标题: 请教兔耳组织如何脱水、透明和包埋？

我将兔耳组织剪成0.5X0.5cm小片(未去毛)，用酒精梯度脱水，二甲苯透明30min两次，然后浸蜡1h共3次，可是包埋后，一切组织就碎成碴了。切片机用的是新买的SLEE的全自动机子。我包埋的几个蜡块都是这样。
请问如何才能做好这些步骤，以便切出好的切片？

作者: xuwan 时间: 2007-1-18 16:19

脱水时间是不是太长了？

作者: zhlxj 时间: 2007-4-11 17:47

你无水乙醇脱水时间多久呢，用几缸无水乙醇？
我做过兔耳朵切片（感觉好做），我用的是手工脱水，无水乙醇用两缸，每缸2~3小时，还有透明我也用两缸二甲苯，每缸1.5~2小时。
你试试看。

作者: lijie208239 时间: 2007-4-13 19:23

你的时间太长了吧。在切片的时候别再冻蜡块了，兔耳也够硬的了，先尝试下吧。

作者: hakase 时间: 2007-4-24 10:09

我用酒精梯度脱水是，70% 30min, 80% 30min, 90% 30min, 无水乙醇 30min, 然后是二甲苯透明二次，各30min, 有一次看好象未透明，又加了一次二甲苯30min，完全透明了。
然后浸蜡，共3次，每次1小时，在烘箱中保持65-70度浸的，蜡是上海产的。浸蜡完后发现组织好象较硬。
可是做成蜡块后，一切就碎，从来没成功过。
请教各位老师，我如何解决这个问题呵？

作者: hakase 时间: 2007-5-10 13:02

哪位老师帮一下忙呵，万分感谢。

作者: 驻书虫 时间: 2007-9-14 10:16

我也正准备做兔耳，那位老兄帮帮忙，详细说一下脱水透明和包埋，小妹先谢谢了！

作者: lijie208239 时间: 2007-9-27 20:14

用些熔点高的石蜡进拉的时间放短点这些都是实验性的别指望谁能给一个准确的只其实也不纯在好多东西都是在变化的
时间长了你就会知道了

作者: 驻书虫 时间: 2007-9-28 14:16 标题: 回复 #8 lijie208239 的帖子

谢谢您的回复，非常感谢！

作者: 江南 时间: 2007-10-8 22:39

我也做过，很好啊，你可能是脱水时间太长了，尤其是二甲苯的时间，一定要注意，我是手工脱的，边脱水边看，

作者: liuzw 时间: 2007-10-17 10:32

乙醇各步50分钟;二甲苯1,15分钟;二甲苯2,15分钟;浸蜡1,50分钟;2,50分钟;3,40分钟;熔点58度

作者: liuzw 时间: 2007-10-17 10:33

切时不用冻,修完面后直接用冰敷一下效果特好

作者: 痞子张 时间: 2007-11-27 10:19

引用:

原帖由 hakase 于 2007-4-24 10:09 发表
我用酒精梯度脱水是，70% 30min, 80% 30min, 90% 30min, 无水乙醇 30min, 然后是二甲苯透明二次，各30min, 有一次看好象未透明，又加了一次二甲苯30min，完全透明了。
然后浸蜡，共3次，每次1小时，在烘箱中保持 ...

脱水时间太短

作者: liuzw 时间: 2007-11-27 10:51

你的二甲苯时间太长了,我的一个15分一个20分,先试试效果

作者: gaolice 时间: 2008-1-22 13:11

透明的时间好像长了些

作者: abcd888898 时间: 2008-5-3 17:29 标题: 具体步骤

那哪位有家兔兔耳具体的处理步骤啊？

作者: 寂寞的雨天 时间: 2008-7-25 16:36

好老的帖子，我做过效果还可以,耳朵上的毛长的话还是剪掉好，大小0.5*1CM左右，太长脱水不彻底，最后切片容易碎，脱水同普通的病理，因为还有其他组织一起做，70% 30MIN,80% 30MIN,95% 1道过夜，95% 2道30MIN,95% 3道 1H,无水 1道30MIN,无水2道 30MIN.，估计你透明太久了，太硬，我是2缸二甲苯，每缸15分钟。

作者: 镜子王朝 时间: 2008-7-25 23:32

毛要去掉，但也不必像下馆子吃鸡剥鸭那样干净，关键是要用苯酚软化。之后普通脱水程序即可。

[ 本帖最后由镜子王朝于 2008-7-26 00:09 编辑 ]

作者: nancy.carter 时间: 2009-11-30 21:28

兔子耳朵是要看什么的？

作者: klgxy 时间: 2009-12-7 10:12

我们做兔子的血管刺激时，取材0.5×1cm，固定两天左右。跟大动物的脱水透明时间一样，使用自动脱水机，60％－70％－80％－90％95％－95％－100％酒精各1.5h，两缸二甲苯各1.5h，石蜡两缸分别1h，1.5h。切片时用冰孵一下，可以切4um，效果还可以。

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