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标题: 请教大鼠脱水问题 [打印本页]

作者: dora2008 时间: 2007-5-29 21:16 标题: 请教大鼠脱水问题

我是做动物病理的,在做大鼠肝脏和胰腺的时候,切片时感觉组织很脆,切片总是有裂痕,我的脱水时间是:
      70%             2h
      80%             2h
      90%             2h
      95%             2h
      100%Ⅰ       30min
      100%Ⅱ       30min
      100%Ⅲ       1h
      正丁醇          1h
      TM试剂       30min
      浸蜡             40min
   请各位高手多多指教！

作者: zhaoying241 时间: 2007-5-31 08:04

不知你的标本块多大，按照常规标本大小看，100％酒精的时间有些长了，会导致标本变脆。
另外，正丁醇的作用是脱水兼透明，其作用相对二甲苯要缓慢的多，时间有些不够。
不知TM试剂是什么，但浸蜡时间也显得少，因为正丁醇在石蜡液中被置换的速度慢。
切片的厚度要注意，尤其是肝、脾等组织，一般5um。

作者: dora2008 时间: 2007-5-31 19:15

标本组织较小,厚度5毫米左右,1×1c㎡，TM试剂是一种透明剂，作用比二甲苯缓慢些，可否将具体脱水时间列出，让小女子借鉴一下，多谢。

作者: zhaoying241 时间: 2007-6-3 22:13

大鼠肝脏和胰脏标本（1cm×1cm×0.5cn）的手工处理过程：
70％、80％、90％酒精不少于3～4小时，最好中间换一次新酒精。95％酒精过夜。
次日，100％酒精2小时，期间换新酒精1～2次，二甲苯1.5小时，中间换一次，以标本透明好为准，胰脏可能比肝脏透明要快一些。浸蜡（58～60度蜡）1.5小时，与二甲苯时间相同，中间换新蜡液1～2次，包埋。
若是采用正丁醇透明，时间要长一些，同样的标本块是皮肤，则需要透明5～6小时，以透明好为准，浸蜡也需3～4小时，期间要多次更换新蜡液，以置换正丁醇。
切片很脆，有时可能是浸蜡时间不够所致，标本内透明剂存留较多也会影响切片的质量，有时标本脱水不彻底也会使切片发脆、发碎。另外，石蜡内应加入一定量的蜂蜡，以增强石蜡的黏性，否则也会产生切片横裂的现象，还有切片刀的角度应在4～6度范围，过大也会使切片横裂。
相对肝脏（5um）而言，胰脏非常好切片。

[ 本帖最后由 zhaoying241 于 2007-6-3 22:18 编辑 ]

作者: dora2008 时间: 2007-6-4 20:24

哦,知道了,我试试,多谢

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