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标题: 请教关于兔子心脏切片的问题! [打印本页]

作者: huoxin200200 时间: 2007-6-5 19:53 标题: 请教关于兔子心脏切片的问题!

大家好!
我在做兔子心脏的切片,好头疼啊!取了整个心脏横断面厚度为0.3毫米包埋的,每次切都碎啊!我制作蜡块的过程如下:
70%酒精10分钟,80%2小时,95%2小时,95%2小时,100%2小时,100%2小时,二甲苯两次共30分钟.浸蜡3小时(蜡经过反复炼,在修蜡块时感觉很有韧性,应该还不错的).
我就是按以上步骤做的,但我切的心脏90%都切不完整,而且易碎!难道我取的面积太大吗?这是我毕业论文的重要部分啊,请教大家啊!
急!!!!!

作者: zhaoying241 时间: 2007-6-5 20:53

为什么标本在70％酒精中停留10分钟？
在100％酒精为什么停留4小时？
二甲苯透明后的标本状态是什么样的？透明好了吗？
为什么在石蜡液中浸蜡3小时？有什么用意吗？石蜡的熔点为多少？
如果将这几点弄清楚，标本不会做不好。
另外，切片碎，那标本蜡块表面的状况是什么样的，标本有没有发白的现象，切下来的切片是呈现碎末还是打卷？
提供一个实验程序，仅供参考。
标本（0.3mm厚）固定后，70％、80％、90％酒精脱水不少于3～4h，95％酒精过夜。
次日，100％酒精1.5h，期间换一次酒精，注意标本与酒精的比例（1：20），二甲苯1h～1.5h左右，以标本透明好为准。58度蜡，浸蜡1.5h，期间换一次蜡，包埋。切片刀要锋利，切片5～7um，即可。
总之，一般不会很困难。

作者: huoxin200200 时间: 2007-6-6 17:31 标题: 回复 #1 huoxin200200 的帖子

我也是参考病理学实验技术(是本很老的书,我记不清是什么时候的版本了)书上的时间做的,
肝,肾,脾,血管做的切片还好些,就只有心脏,切片是碎末状的,我没有看到发白的现象.70%酒精书上说略微浸哈就行,所以时间就短些!标本透明后是那种透明微黄的，我透明时都没有超过半个小时呢，如果时间过长了，难道不怕标本很脆吗？

作者: zhaoying241 时间: 2007-6-9 21:32

肝、肾、脾、血管的标本切的还可以，按理说心脏的切片也应该没有问题，因为肝脾标本要较心脏难切些。
上次提供的实验程序是我校本科生技术课程中操作的时间表，学生第一次操作和切片，都很好，标本很完整，没有碎的现象出现。由于没有看到切下的蜡片和蜡块表面的情况，不知问题出现再哪里，能否传上照片看看。

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