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标题: 抗体选择问题？ [打印本页]

作者: 闲云 时间: 2008-4-28 10:57 标题: 抗体选择问题？

我最近做一免疫组化方法，但就是没找到用于石蜡切片的抗体，只得买了做细胞和冰冻的抗体，结果在细胞上很好着色（冰冻没条件做），在石蜡切片上再怎么折腾就是没特异性的着色，求求大家，用于冰冻和石蜡的抗体有这么大差异吗？？？为什么呢？？？？

作者: shanghainese 时间: 2008-4-28 11:35

因为石蜡切片上的抗原已经变性了。

作者: 冰雪 时间: 2008-4-29 08:29

只知道不能做,不知到为什么不能做,能详细解释一下吗?多谢啦

作者: shanghainese 时间: 2008-4-29 12:00

引用:

原帖由冰雪于 2008-4-29 08:29 发表
只知道不能做,不知到为什么不能做,能详细解释一下吗?多谢啦

很简单。石蜡切片上的组织抗原经过福尔马林固定和制片过程后发生了变性。原来与抗原反应的部位也可能发生了改变，使得一些抗体无法识别抗原了。但是也有一些抗体所识别的抗原部位不因固定和制片过程而发生改变，所以抗体仍然可用在石蜡切片上。

作者: 冰雪 时间: 2008-4-29 14:01

作者: 闲云 时间: 2008-4-30 11:29

谢谢版主!

作者: 文艺峰 时间: 2008-5-9 22:35

那石蜡切片是多数抗原会变性，还是只是少数呀？

作者: dingwei 时间: 2008-5-10 08:22

大多数，所以需要各种抗原修复方法。

作者: 闲云 时间: 2008-5-19 16:53

组织固定变性是指的蛋白的一级结构发生的变化吗？这种能复原吗？
修复应该主要只是让发生交联的蛋白充分暴露，修复液只是在高温时保护抗原吧！？
（不太专业，敬请指正）

作者: shanghainese 时间: 2008-5-22 00:19

引用:

原帖由闲云于 2008-5-19 16:53 发表
组织固定变性是指的蛋白的一级结构发生的变化吗？这种能复原吗？
修复应该主要只是让发生交联的蛋白充分暴露，修复液只是在高温时保护抗原吧！？
（不太专业，敬请指正）

作者: 闲云 时间: 2008-5-23 10:54

俺错咯了！斑竹，别笑我！！！

作者: shanghainese 时间: 2008-5-23 12:35

我是笑你这个娃儿太聪明了。
我的脑壳虽然笨，但还是看出你在耍啥子名堂。所以忍不住就笑起来了。

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