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标题: 学习中的一点疑惑？恳请高手指点！ [打印本页]

作者: colin 时间: 2008-5-29 15:02 标题: 学习中的一点疑惑？恳请高手指点！

有机会在外出进修，但发现一个问题一直缠绕心头。问老师，老师也没有整个所以然。在这请教各位高手

   由于学的是肾脏穿刺技术，所以是关于穿刺组织的。
   切片2um常规二甲苯或者是松节油脱蜡2h比常规的要多N倍（时间短了不上色）
   苏木素20min（短了核染的不清楚）；伊红10min （各个酒精有关步骤省略）
   不知道什么原因？？？？？？？？？？？？
   试剂为harris 苏木素，伊红为水溶性伊红。不管刚配的还是旧得染液，都有这个问题。旧液时间更长一些。

作者: ChenRong 时间: 2008-5-29 21:55

你问的大致意思是染不上色。
1，你可以切3UM,薄了会不易燃色（但不至于像你形容的那么淡）
2，脱蜡各10分钟就可以，苏木素5分钟，伊红30秒很红了（建议用醇溶性伊红，500ML95%酒精加醇溶性伊红2.5克左右）。
3，你可以拿到其他医院试试或买点伊红和苏木素试试。
4，固定脱水是否好。

作者: colin 时间: 2008-5-30 09:03

谢谢老师回复。但肾脏穿刺组织尽量要切到2um,

先找找原因看看是不是试剂的原因。

作者: 带球过人 时间: 2008-5-30 20:39

可以试试加热

作者: shanghainese 时间: 2008-5-31 12:25

都没有回答到点子上。
请继续回答。

作者: 张椽椽 时间: 2008-6-3 22:39

应该不会这样啊！

作者: colin 时间: 2008-6-4 14:55

引用:

原帖由 shanghainese 于 2008-5-31 12:25 发表
都没有回答到点子上。
请继续回答。

请我们的高手支招！
谢谢。

作者: lijie208239 时间: 2008-6-9 21:36

在脱水前水洗以下，你用的是什么类型的固定液也不是太清楚希望你能把从取材到切片的工作过程全部上传。那样更容易发现问题。

作者: colin 时间: 2008-6-11 09:39

引用:

原帖由 lijie208239 于 2008-6-9 21:36 发表
在脱水前水洗以下，你用的是什么类型的固定液也不是太清楚希望你能把从取材到切片的工作过程全部上传。那样更容易发现问题。

取材:常规肾脏穿刺标本.
   脱水:常规石蜡脱水.(脱水绝对没有问题)
   切片:2um石蜡切片
   染色过程上面已经有了.而且是建议中的脱水前洗一下这问题好像对我们这没有什么影响.

作者: shanghainese 时间: 2008-6-11 11:58

原因是片子切薄了。

作者: shanghainese 时间: 2008-6-12 12:35

怎么没问题了？

作者: colin 时间: 2008-6-13 08:39

引用:

原帖由 shanghainese 于 2008-6-11 11:58 发表
原因是片子切薄了。

可是肾脏穿刺标本的片子，稍微厚了一点，镜下效果就不好了。上次切了三个um看片的老师还一直喊片子不行！

作者: ChenRong 时间: 2008-6-13 20:27

引用:

原帖由 shanghainese 于 2008-6-11 11:58 发表
原因是片子切薄了。

转了半天你的答案也是薄啊

作者: ChenRong 时间: 2008-6-13 20:27

引用:

原帖由 colin 于 2008-6-13 08:39 发表

可是肾脏穿刺标本的片子，稍微厚了一点，镜下效果就不好了。上次切了三个um看片的老师还一直喊片子不行！

3um看的很清的啊。我看过前期的片子，很好。

作者: shanghainese 时间: 2008-6-13 21:53

引用:

原帖由 ChenRong 于 2008-6-13 20:27 发表

转了半天你的答案也是薄啊

但是，薄了以后为什么会不易燃色呢？

作者: feyzdg81 时间: 2008-6-14 22:48

一般厚度1--2UM左右,我想厚度是没有问题的,应该是试剂的问题.

作者: colin 时间: 2008-6-16 10:10

引用:

原帖由 feyzdg81 于 2008-6-14 22:48 发表
一般厚度1--2UM左右,我想厚度是没有问题的,应该是试剂的问题.

今天突然发现了一个问题了，我们的苏木素啊有一股酸酸的味道，就算是苏木素的问题，可脱蜡怎么要那长时间呢？
二甲苯和松节油都没有问题的啊！不解？

作者: ChenRong 时间: 2008-6-16 20:53

引用:

原帖由 colin 于 2008-6-16 10:10 发表

今天突然发现了一个问题了，我们的苏木素啊有一股酸酸的味道，就算是苏木素的问题，可脱蜡怎么要那长时间呢？
二甲苯和松节油都没有问题的啊！不解？

看来苏木素不是你配的了，它本来就是酸味。脱蜡两缸各10分钟是正常时间，短的可以各5分钟。2UM片子细胞里的核，细胞器等等不易染色（东西少了，要吸苏木素的量少了）但不会是染不上，染的颜色还是很好的（我不提倡2UM）说的复杂了，我都不知道怎么说了，晕。你还是到其他医院里染下看看，好的说明你脱水固定没问题，燃料有问题。不好说明你片子有问题（脱水和固定。）。可以很快排除问题。
美国的兄弟如何！

作者: shanghainese 时间: 2008-6-17 13:05

引用:

原帖由 ChenRong 于 2008-6-16 20:53 发表

看来苏木素不是你配的了，它本来就是酸味。脱蜡两缸各10分钟是正常时间，短的可以各5分钟。2UM片子细胞里的核，细胞器等等不易染色（东西少了，要吸苏木素的量少了）但不会是染不上，染的颜色还是很好的（我不提倡 ...

鼎特了。

作者: 猫儿 时间: 2008-6-17 14:06

你们染得都这么久啊
我们这苏木素1.5分钟
伊红10秒

作者: colin 时间: 2008-6-19 10:24

换为水溶性的试一试！

作者: wangchouchou 时间: 2008-6-19 22:06

与切片薄厚无关，只要染液染其他组织没有问题，估计可能是前期固定的问题。我做过好几年的肾穿标本，也是2微米效果一直不错。建议福尔马林浓度增加至15%-20%，试一试看看效果如何。

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