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标题: 改良Giemsa染色检测幽门螺旋杆菌的配制方法 [打印本页]

作者: busy617 时间: 2008-7-23 10:42 标题: 改良Giemsa染色检测幽门螺旋杆菌的配制方法

请教各位老师:
在石蜡组织切片上检测Hp是不是改良Giemsa染色最好?怎么配制染液?谢谢

作者: ylzhao 时间: 2008-7-24 12:25

http://library.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/MANUALS/MGIEMSA.PDF

作者: ylzhao 时间: 2008-7-24 12:32

下面微波Giemsa法可以用,我认为没有美蓝和甲苯胺蓝法效果好.
微波Giemsa染色法
试剂:
盐酸乙醇液： 38%盐酸0.5ml, 70%乙醇99.5ml。
Giemsa贮备液： 把60ml甘油放入250ml烧瓶中再加Giemsa染料0.75g，然后放入56～
58℃烤箱内过夜。将染液移出烤箱后趁热加入甲醇40ml，充分混合后棕色瓶内保存。
10%Triton X-100：Triton X-100 10ml,蒸馏水90ml, 液体要充分混合。
Giemsa工作液：Giemsa 贮备液10ml，甲醇1ml，蒸馏水40ml, 10%Triton X-100 4ml。
1%冰醋酸水溶液： 冰醋酸 1ml, 蒸馏水99ml。
微波Giemsa染色法步骤
1．切片脱蜡至蒸馏水。
2．切片盐酸乙醇中液浸10min。
3．水洗5min。
4．蒸馏水洗。
5．切片在Giemsa工作液内经微波炉60W（输出量600W）4min。
6．蒸馏水洗。
7．1%冰醋酸水溶液分化数秒钟。
8．95%乙醇，无水乙醇脱水。
9．二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：细菌（幽门螺杆菌）呈蓝色或淡紫色，细胞核呈蓝色，淋巴细胞胞浆呈淡蓝色或紫色。肥大细胞胞浆，嗜酸性粒细胞胞浆颗粒呈红色。红细胞呈橘**。黑色素颗粒蓝黑色或深绿色。

[ 本帖最后由 ylzhao 于 2008-7-24 12:33 编辑 ]

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