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标题: 求助:掉片 [打印本页]

作者: fighting    时间: 2008-8-5 13:41     标题: 求助:掉片

请教各位老师:
           我最近在做大鼠大脑石蜡切片的免疫组化(4um厚),结果老掉片。
    具体步骤是:干净的玻片用多聚赖氨酸包被后入烤箱1小时烘干,展片、捞片后入58度烤箱过夜烤干,结果掉片。我又加大多聚赖氨酸浓度(1:6、1:3),仍掉片。甚至用未稀释的多聚赖氨酸,还是掉片。心都碎了!
    两个月前用同样的方法做的时候没有出现这个问题。现在老掉片,我找不到原因。假期正好实验室的老师都不在,只能自己摸索。各位老师有什么建议?小女子不甚感激!!!
作者: bbfwind    时间: 2008-8-5 16:09

 建议你用4%甲醛明胶来处理玻片呀.
作者: fighting    时间: 2008-8-5 16:16

引用:
原帖由 bbfwind 于 2008-8-5 16:09 发表
 建议你用4%甲醛明胶来处理玻片呀.
谢谢bbfwind!但是我觉得不是粘片剂的问题,有没有其他的建议呢?
作者: wangze8229    时间: 2008-8-7 09:35

58度烤片不用过夜的,一般30分钟到一小时就可以,只要切片上的蜡溶了就可以。
作者: www123    时间: 2008-8-31 14:33

脑组织易掉片,建议用滤纸吸一下.
作者: fangdang    时间: 2008-9-1 11:25

1。如果预处理不好(固定、脱水)脑组织磷脂含量高,不管是多聚赖氨酸还是APES对脂质的黏附性都不是太好!你可以试用阳离子玻片!
2。改善预处理方式。
作者: ljs    时间: 2009-12-15 18:42

多聚赖过期没?我用了原液5μL一张玻片。你可以试试
作者: jiaguotao    时间: 2009-12-17 09:27

你所谓的“干净”玻片,不是真正的干净!只有处理好的载玻片才能涂上多聚赖氨酸!才能称为免疫组化的专用载玻片呢!请教丁伟老师吧!我就不敢造次了!
作者: 冰雪    时间: 2009-12-29 22:16

脑组织一定要进行灌注处理,预处理不好(固定、脱水),肯定脱片,这是我们早在十年前就解决掉的问题。




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