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标题: 我的巴氏染色步骤有问题么? [打印本页]

作者: amorxyq 时间: 2008-12-25 13:03 标题: 我的巴氏染色步骤有问题么?

95%乙醇固定10-20分钟→80%乙醇30秒→70%乙醇30秒→50%乙醇30秒→水洗30秒→苏木素染色5分钟→水洗30秒→0.5%盐酸酒精3-5秒→水洗30秒→氨水溶液30秒→水洗10分钟→50%乙醇30秒→70%乙醇30秒→80%乙醇30秒→95%乙醇1分钟→橙黄G染色3分钟→95%乙醇30秒→95%乙醇30秒→EA50 5分钟→95%乙醇30秒→95%乙醇30秒→无水乙醇1分钟→自然晾干→中性树脂封片。
请大家帮忙看看我的染色步骤是否有问题，我们做的巴氏染色片子效果总是不理想，细胞总是染不出绿色，不知道问题出在哪里了。

作者: dingwei 时间: 2008-12-25 13:39

EA50 5分钟?
可能是配的有问题, 我只要20秒

作者: amorxyq 时间: 2008-12-26 12:15

引用:

原帖由 dingwei 于 2008-12-25 13:39 发表
EA50 5分钟?
可能是配的有问题, 我只要20秒

丁老师，可否告知EA50的配置步骤呢，我们科一直没有研究出正确的方法，望老师指点一下，万分感谢！

作者: dingwei 时间: 2008-12-26 16:13

主页上有http://www.dingw.com/detail-87.html
个人认为还是EA36染的好

作者: dingwei 时间: 2009-1-8 09:07

配好后染液滴在滤纸上的颜色

作者: amorxyq 时间: 2009-1-13 18:05

丁老师，EA36配置时三种溶液混在一起会产生沉淀，需要过滤以后才能用么？

作者: aIdikang 时间: 2009-1-15 16:28

你的染色步骤太烦琐，下面步骤请参考！
95%酒精（固定5~10分钟）→水洗（简单洗去酒精即可）→苏木素（5分钟）→水洗（简单清洗）→0.5%盐酸酒精分化液（不超过3秒）→水反蓝（1分钟左右，如果颜色较淡可延长反蓝时间）→75%酒精→橙黄溶液（2~10秒）→85%酒精→95%酒精→EA50溶液（1分钟）→95%酒精→95%酒精→95%酒精→无水乙醇→无水乙醇→无水乙醇（3分钟）→放置TO里面湿封片！

作者: aIdikang 时间: 2009-1-15 17:14

以上染色方法简洁，时间短，染色质好！

作者: zf1120 时间: 2009-1-20 10:36

橙黄G染色3分钟?这么长
我最多半分钟
还有橙黄G后有没充分洗净

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