中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: Chengrong老师帮忙看看 [打印本页]

作者: rongye_xj 时间: 2009-5-10 21:33 标题: Chengrong老师帮忙看看

[attach]2981[/attach]

[ 本帖最后由 rongye_xj 于 2009-5-10 21:48 编辑 ]

作者: rongye_xj 时间: 2009-5-10 21:49

[attach]2982[/attach]

作者: rongye_xj 时间: 2009-5-10 22:01 标题: 请Chengrong 老师和给位同仁帮忙分析一下

处理程序：中性缓冲液固定 3小时
               70%、80%、95%、95%酒精各一小时
               100%、100%酒精各45分钟
               二甲苯（1）、二甲苯（2）各1小时
               浸蜡三小时

结果：标本软，没有硬度，包埋时浮于蜡上不下沉。切片时组织没有硬度切不下来，切过的蜡块在室温下放置几个小时后组织处凹陷、变干。

回炉处理：二甲苯  30分钟——梯度酒精（高——低）洗脱二甲苯——固定3小时——……（同上程序）

结果：组织干，硬，制片困难，染出的切片如上。

请大家帮忙分析原因。此程序之前处理标本一直很好，近两日出现此现象，跟换了新液体后情况更糟糕。

作者: rongye_xj 时间: 2009-5-10 22:02

[attach]2983[/attach]

作者: rongye_xj 时间: 2009-5-10 22:02

[attach]2984[/attach]

作者: ChenRong 时间: 2009-5-10 23:05

1，你的组织蜡没有侵入。问题在于你的脱水不彻底。
2，按照你的脱水程序不大会弄成你这个样的啊？？，会不会试剂不纯？
3，二甲苯两个时间常温时只要1个小时。（二甲苯有饿、问题吗）
4，是机器脱还是手工拎？如是机器，什么机器。
5，你的包埋是手工还是机器。
6，以前一直这个样还是就最近，如是最近想想有什么变动，如：机器修过，试剂换过（还错了，如二甲苯换成了酒精之类的）。
7，不要叫我老师，我只是打字多点。请其他同行都来打打字。讲讲。。。

作者: ChenRong 时间: 2009-5-10 23:06

忘了，固定也是个问题。

作者: qibaomeimei 时间: 2009-5-11 00:18

嗯我也曾经碰到过这样子的。机子出毛病，蜡块晾外面风干了，我怕脱水不彻底，过30min无水微波低档加温，透明，浸蜡，出来其他组织都还可以，就淋巴结像上面那样模糊不清。后来又有一次风干，我直接透明浸蜡，脱水不彻底，虽然不好切，但是没有上面的问题。（固定过才卡缸）

作者: 黄树叶 时间: 2009-5-11 14:05

从组织上来看脱水是不干净了原因我觉得是不是标本漂浮起来了没有浸透也就是说你机器里的液体太少了呢？

作者: rongye_xj 时间: 2009-5-12 13:47

我们用的是湖北泰维的和leicaASP300脱水机，之前一直是这样，leica那天跟换了液体后机器就这样了，初步考虑是酒精的问题，再次跟换后问题就没有了，到目前也不明白是怎么回事。湖北泰维的国产机是之前液体量为液体缸的一半，处理的都还是挺好的，leica出了问题后就为防万一也把液体跟换并量加大了，结果……

所有机器都一样出问题了。过了个周末，它们自己又好了。
我们的组织处理和包埋全是机器，染色封片也是机器。
问题出现后考虑固定的问题了，加大固定液量和时间后整批标本同前。
总结了：应该还是脱水问题。其他都可以排除了。（其实自己还是没有彻底搞明白，只是找不到其他原因了）
谢谢各位老师的指导。

作者: jiaguotao 时间: 2009-5-12 15:52

脱水处理是关键，否则后面的程序再好，那么抱歉出不来好的切片，染色更不能染好！重新设定程序吧！

作者: ChenRong 时间: 2009-5-12 18:27

看了你对机器的原因，我看了有点晕呼。会不会是机器有小堵的问题。

作者: 张椽邹 时间: 2009-5-18 22:15

我认为主要还是组织脱水不好

作者: 熊成勇 时间: 2009-7-19 13:06 标题: 回复 1# 的帖子

检查一下你的第一缸二甲苯

买个酒精计测一下你无水酒精的浓度

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)