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标题: 求助,各位高手,冰冻切片----免疫组化问题 [打印本页]

作者: dianxin123    时间: 2009-5-25 09:11     标题: 求助,各位高手,冰冻切片----免疫组化问题

我做的的是 鸡小肠的冰冻切片,切到5微米,放入-20保存,第二天冷冰丙酮固定,常规免疫组化做法。
但是加3%的双氧水后起气泡????是因为过氧化物酶太强吗?还是不正常的啊?
还有DAB显色后不能发现大量细胞核,有空泡现象
请大家帮我分析一下
作者: 6504339    时间: 2009-5-25 12:06

图太模糊!应该是组织自溶了!先固定再保存到-20度!
作者: dianxin123    时间: 2009-5-27 09:20

顶一下,会是冰晶造成的吗?
作者: 6504339    时间: 2009-5-27 10:39

嗯!把组织放入液氮中速冻10-20S,用OCT包埋切片,冰丙酮固定在保存到-20度,或者在20%-30%的蔗糖溶液高压脱水,冰箱4度过夜,组织沉淀后,取出用 PBS冲洗后OCT包埋切片可降低冰晶化程度。
作者: shanghainese    时间: 2009-5-27 14:12

引用:
原帖由 dianxin123 于 2009-5-27 09:20 发表
顶一下,会是冰晶造成的吗?





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