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标题: 急急急:请教脱水问题!!! [打印本页]

作者: wu126    时间: 2009-8-5 18:31     标题: 急急急:请教脱水问题!!!

我科脱水机自从前几日维修后便出现严重脱水问题。更换了多套脱水程序,但组织块切起来都不理想。在此求助各位老师帮忙找找原因。谢谢!
脱水机为:徕卡ASP300
脱水程序为:10%甲醛   90~~120min       37`C        P/V
                         70%乙醇   1h                         35`C        
                         85%乙醇   1h                         35`C        
                         95%乙醇   1h                         35`C        
                         95%乙醇   1h 30min            35`C        P/V
                         95%乙醇   1h                         35`C        
                         100%乙醇  1h 30min             35`C        
                         100%乙醇  1h 30min             35`C        P/V
                         二甲苯I     1h                       35`C                                    
                         二甲苯II          45min                35`C        V
                         石蜡I               1h                        62`C        P/V
                         石蜡I I             1h                        62`C        P/V
                         石蜡I I I           1h                        62`C        P/V
组织块表现:色无光泽、包埋时组织块不会感觉硬,但切片时且较硬、粗修时切面散在灰白区、切起的组织片厚薄不均、细胞核染色无光泽且部分着色浅
作者: 6504339    时间: 2009-8-5 20:20

固定时间似乎不够,应该在4到6  小时,细胞核染色发灰,无光泽,着色浅可能10%的中性甲醛引起的,在固定液后加水洗半小时或者将苏木素的的PH值降低一点。脱水程序,在35度下你的脱水程序时间似乎长了点,常温(18度)的下脱水总的时间也就在9个小时左右第三缸蜡时间长点2小时。
请问:粗修时切面散在的灰白区是否是指切片时组织成粉末状?
实在不行,换新的脱水机,新的 好 用
作者: ChenRong    时间: 2009-8-5 20:42

1,二甲苯两缸时间控制在1小时以内。
2,切片厚薄不一,似乎是切片机刀架没固定好,请清理刀架垃圾。
3,发白的原因可能是脱过头的脆,另外还有脱水不彻底,和固定不佳。
4,细胞核染色无光泽且部分着色浅,估计是固定不好和脱蜡、脱二甲苯时间不够不彻底,加长时间和换二甲苯和二甲苯后面的酒精,特别是无水的。
作者: ChenRong    时间: 2009-8-5 20:44

另外,你的机器修过,会不会有温度控制不对的原因在?或其他
作者: adriana    时间: 2009-8-17 22:21

那就是你的机器的问题了!程序基本没有太大的问题。。看试剂排放,加压,搅拌等是否运行,还有就是各阀门是否通畅,需要检测4各脱水的使用阀门检修,担心的问题是中间管道堵塞等。。空机运行一次看看!可以发现一些情况的、。
作者: 朱珠    时间: 2009-8-17 23:01     标题: 脱水

我觉得是纯酒精时间长,组织发硬,适当将纯酒精时间缩短,另外蜡1时间长,缩短苯蜡时间。




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