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作者: joanna 时间: 2002-11-9 15:02 标题: [求助]

HI，各位高手：
我做原位杂交的过程中碰到些问题，恳请指点：
1、我用4%多聚甲醛固定早孕期绒毛，之后浸于蔗糖中，待下沉后冰冻切片。请问固定需多长时间合适？（我的组织疏松，如一团银耳状）
2、我买的DAB浓缩液，配成的工作液呈淡淡的黄色，滴在组织上，在镜下看到的组织就为黄色，很难判断何时该终止反应，这问题该如何克服？另外，DAB最长可反应多长时间？H2O2的浓度为0.01%好还是0.015%?
3、冰冻切片在37度烤片,多长时间合适?过长是否不利于后面的杂交步骤?
:em02: :em02:

作者: dingwei 时间: 2002-11-9 20:18 标题: [求助]

我们只做石蜡的原位杂交，冰冻的没经验

作者: 肥肥佬 时间: 2002-11-10 21:15 标题: [求助]

引用:

下面引用由joanna在 2002/11/09 03:02pm 发表的内容：
HI，各位高手：
我做原位杂交的过程中碰到些问题，恳请指点：
1、我用4%多聚甲醛固定早孕期绒毛，之后浸于蔗糖中，待下沉后冰冻切片。请问固定需多长时间合适？（我的组织疏松，如一团银耳状）
2、我买的DAB浓缩 ...

是做半导体制冷的切片吗？否则固定后的组织冰冻切片不宜。DAB和H2O2的使用各实验室的质控标准是不一样的，不好一概而论。冰冻切片好像不用烤片吧。

作者: ketty 时间: 2002-11-11 21:14 标题: [求助]

没做过杂交，很尴尬！ :em15: :em15: :em20: :em20: :em17:

作者: 可乐猫 时间: 2002-11-13 22:45 标题: [求助]

引用:

下面引用由肥肥佬在 2002/11/10 09:15pm 发表的内容：
是做半导体制冷的切片吗？否则固定后的组织冰冻切片不宜。DAB和H2O2的使用各实验室的质控标准是不一样的，不好一概而论。冰冻切片好像不用烤片吧。

现在哪里还有用半导体制冷做冰冻切片的？早就淘汰啦！

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