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标题: 请教 [打印本页]

作者: 猫儿 时间: 2009-9-15 17:07 标题: 请教

请教各位前辈
最近我们科医生反映片子刚刚做出来看还可以时间久一点看颜色就不好了
为何？

作者: jiaguotao 时间: 2009-9-16 16:30

说详细点！

作者: ChenRong 时间: 2009-9-16 22:48

应该比较明显的是盐酸酒精分化后没有洗干净，请在流水里多洗一点时间

作者: jiaguotao 时间: 2009-9-17 16:12

蓝没了————返蓝时间不够，
红没了————20年前的片子可以出现这种现象，属于正常！短时间内出现，就不知了！

作者: 猫儿 时间: 2009-9-17 16:37

一个月后觉得片子颜色有点灰暗不新鲜的样子
请问片子在做出来多久后颜色不好了属正常范围内？
谢谢各位前辈回帖

作者: 6504339 时间: 2009-9-17 22:30

切片易褪色的原因
　　制成的组织切片,其染色结果有的能持久保存,有的则易褪色,其常见原因可归纳为两大类: ①染料的性质及染料与组织的作用,染料与组织所形成的色淀结合牢固,其染色结果就能永久保持; ②制片过程中的原因致切片易褪色。
1 　组织处理不当　,固定不佳或固定时间过久(酸化) ,固定液pH 值不适宜; 固定较久的组织,特别是用含铬酸、重铬酸钾及锇酸等固定的组织,脱水前未将组织内部的固定液经流水彻底冲洗除去,影响了细胞核染色和保存。
2 　染色前处理失当
3 　染色时处理失当　染液及所用试剂酸碱度不适宜是一个很常见的重要原因。如HE 染色时,用碱性过大的溶液返蓝,就易引起胞质褪色,而用pH 715～8 的弱碱性溶液返蓝并经自来水彻底冲洗,就不易引起切片褪色。在配制伊红染液中,若加入促染剂冰醋酸过多,染液混浊甚至沉淀,短时间就失效不能再用,染色结果保持时间很短,染色后切片极易褪色。因此每100 ml伊红染液加1～2 滴冰醋酸较好,如摇动有大量泡沫浮在液面较长时间不消失,说明染液内冰醋酸过多,反之,泡沫少很快消失。
4 　染色后脱水、透明失当
5 　封固剂酸化　封固剂多用二甲苯作为溶剂,时间过长时其中的二甲苯逐渐氧化,生成苯甲酸和邻苯二甲酸而呈酸性,可导致苏木精褪色。故封固剂的酸碱度要适宜,尽量应用中性封固剂。我们在封固剂中放少量大理石或无水碳酸钠,置低温干燥箱内,充分搅拌待澄清后,取上清液备用较好。
6 　封固时天气潮湿　多雨、湿气浸入、组织切片内混入水分含有气泡、封固剂较稀或用量少、盖片小或不平、盖片位置不适当或被移动等,不但可致切片染色模糊不清,而且切片易褪色。
7 　染色后长期光照　封固剂及切片长期置于日光或强烈灯光下,尤其是暴晒于日光下,易引起氧化变酸致切片褪色。
另外,将封固后的切片加温烤干或室温过高时,均能加速封固剂氧化,易引起切片褪色。
8 　载、盖玻片处理不当　不呈中性。

[ 本帖最后由 6504339 于 2009-9-17 22:32 编辑 ]

作者: jiaguotao 时间: 2009-9-21 15:15 标题: 回复 5# 的帖子

这个问题真不好回答，上学的时候没听老师傅讲过！上班之后听过老技师们说过，不过课本上给不出确切的答案！

作者: dingwei 时间: 2009-10-27 21:42

引用:

原帖由 6504339 于 2009-9-17 22:30 发表
切片易褪色的原因
　　制成的组织切片,其染色结果有的能持久保存,有的则易褪色,其常见原因可归纳为两大类: ①染料的性质及染料与组织的作用,染料与组织所形成的色淀结合牢固,其染色结果就能永久保持; ②制片过程中的 ...

很全面！！！

作者: jiaguotao 时间: 2009-10-28 10:37

引用:

原帖由 6504339 于 2009-9-17 22:30 发表
切片易褪色的原因
　　制成的组织切片,其染色结果有的能持久保存,有的则易褪色,其常见原因可归纳为两大类: ①染料的性质及染料与组织的作用,染料与组织所形成的色淀结合牢固,其染色结果就能永久保持; ②制片过程中的 ...

好教材！老版教材的知识点几乎没改变！课本越新知识点跟从前的差距越小！

作者: 痞子张 时间: 2009-10-29 08:27

引用:

原帖由 6504339 于 2009-9-17 22:30 发表
切片易褪色的原因
　　制成的组织切片,其染色结果有的能持久保存,有的则易褪色,其常见原因可归纳为两大类: ①染料的性质及染料与组织的作用,染料与组织所形成的色淀结合牢固,其染色结果就能永久保持; ②制片过程中的 ...

描述很全面，堪称教科书！！

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