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关于鸡蛋清预包埋培养细胞的注意点

关于鸡蛋清预包埋培养细胞的注意点

关于细胞电镜标本制样的方法很多,其中载玻片培养贴壁细胞是个不错的选择,因为载玻片上的细胞容易剥离或刮取且损伤程度最低。但细胞取下后如何处理,如何成团易于切片呢?如果细胞数量足够多,则不需预先包埋,只要每一步都要离心处理一下,只不过繁琐一些。对于细胞数量少的话,只能预先包埋处理。一般都使用琼脂包埋或血清包埋,然而,琼脂包埋的细胞很脆,不利于渗透和切片,血清由于浓度低而不容易成块。现在,给大家推荐鸡蛋清预包埋法,鸡蛋来源丰富且蛋清粘稠度较高,戊二醛固定后容易成团,但必须是新鲜鸡蛋且不能搅拌,否则,粘稠度会明显下降!具体做法如下:1、将原位固定好的细胞刮下、离心、去上清液并用滤纸尖尽量吸掉残液备用。2、去新鲜鸡蛋一个,打破一端小孔,用吸管吸取少量蛋清,如果量超过2ml,则可将蛋清滴到玻片上,用刀片划一下,再用吸管吸取。3、将蛋清加入事先离心好的细胞团,同时用牙签或细针将细胞团推离管壁,使细胞团充分与蛋清混合(至少肉眼能分辨出细胞团),然后再加戊二醛(0.5ml即可),移到4度冰箱继续固定过夜。4、第二天取出细胞团,将多余的蛋清切掉一部分,后续常规处理即可。此方法仅供参考!
努力是根本,健康是关键
个人观点,仅供参考!

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