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组织切片裂隙产生的原因与对策

组织切片裂隙产生的原因与对策

  在日常病理技术工作中,我们经常会遇到组织切片有大
小不等、形状不一的裂隙,特别是富含细胞的组织这种现象
更为常见。我们通过摸索和实践,针对组织切片裂隙的原因
加以分析,用以下简便方法有效地减少或纠正了组织切片的
裂隙,现介绍如下。
1  材料与方法
111  材料 ①常规制片中组织切片出现裂隙的蜡块,如淋
巴结、扁桃体等; ②带盖的广口玻璃容器或塑料容器; ③医用
纱布或脱脂棉; ④5 mmolPL盐酸:取1613 ml浓盐酸加蒸馏水至
200 ml ,即可得5 mmolPL浓度盐酸溶液。
112  方法 ①将切片中出现裂隙的组织蜡块面朝下,置入
带有5 mmolPL盐酸的容器内,浸泡5~10 min ,取出后用干纱
布擦去蜡块表面的盐酸; ②蜡块不需冷冻,在室温(25 ℃) 下
直接上切片机切片,厚度4μm; ③裱片时,先将切片光面朝下
放入冷水中,然后,再用干净的载玻片将其移入漂片仪的水
槽内,温度约45~47 ℃,略展片刻,待切片充分展平后,迅速
裱贴在载玻片上; ④常规烘P烤切片、染色、封固。
2  结果
用此法制作的组织切片平整,结构完好,镜下观察组织
裂隙明显减少或消除(图1 ,2) 。
3  讨论
组织切片裂隙[1 ]是常规制片中经常出现的一大问题,不
仅影响切片质量,而且妨碍诊断。常见的裂隙有的呈不规则
分布,类似“哈密瓜皮”样改变(图1) ;有的呈平行状规则分
布,类似“百页窗”样改变。根据我们的经验和体会,组织切
片裂隙的产生主要有以下几个方面的原因: ①组织处理:由
于大部分医院通常是把大小不一的标本混合处理,难免会出
现标本处理不均的现象。要么大的组织标本处理不足,要么
小的组织标本处理过度,切片的裂隙多出现在固定不好、偏
小、偏薄的组织,特别是细胞成分过多的组织,如淋巴结组
织、扁桃体组织等。这类组织细胞致密,含水量少,易被处理
过度,导致质地硬脆。②组织切片:切片时刀座不稳;使用的
一次性刀片松动、切片刀钝、切片角度过于倾斜、切片动作太
快太猛和蜡块过于冷冻质地变硬等,造成切片时组织出现震
颤,在镜下表现为切片出现沿刀刃方向平行的波纹,类似“百
页窗”样改变。此外,裱片的水温太高,亦可导致组织切片出
现人为裂隙。
鉴于上述原因,为了减少或纠正组织切片的裂隙,我们
建议如下: ①在组织处理时,有条件的单位最好选择大小标
本分开处理的方式。标本固定选择正确的固定液及固定浓
度,不能直接用甲醛原液固定组织,通常选用4 %中性缓冲
甲醛液作为常规组织固定液,固定好后再上机处理,标本取
材不易过薄。②技术人员在每次切片前要仔细检查机器,拧
固刀座,夹紧刀片,防止因机械部分的松动而出现切片裂隙。
调整并固定切片的角度,将切片流程分为粗修和细切,这样
可以有效地保护切片刀,延长切片刀的使用寿命[2 ] 。③裱片
的水温以45~47 ℃为宜,以免水温过高,造成切片扩散,形
成人为裂隙。④对于一般的组织蜡块,切片时冷冻温度以
- 5 ℃为佳,不能过低,否则蜡块太硬,切片时蜡块接触刀刃
易产生震颤,导致切片出现波纹状裂隙。对于硬脆的组织,
可利用盐酸能够软化组织的特点,减低组织的硬度和脆性
(图2) 。组织蜡块短时间浸泡在沾有5 mmolPL盐酸的纱布或
脱脂棉上,达到暂时软化组织蜡块的作用而不会损伤组织,
对组织结构无任何改变,不影响切片的正常使用。
参考文献:
[ 1 ]  Carson FL. Histotechnology[A] . A self2instructional text [M] . 2nd
ed. Chicago :American Socity of Clinical Pathologists Press ,1996. 52
- 56.
[ 2 ]  马恒辉,周晓军,陈国璋. 浅谈组织病理学实验室的标准化
(一) [J ] . 诊断病理学杂志,2002 ,9(6) :374.
收稿日期:2007 - 05 - 15

此文转载于《诊断病理学杂志》2007 ,Vol . 14 ,No. 6
作者:马恒辉,章如松,姚育英,周晓军
作者单位:南京军区南京总医院病理科,

[ 本帖最后由 九日 于 2011-11-28 16:40 编辑 ]

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文章覆盖面挺广的,但是个人觉得比较表观,不够细致

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谢谢,前一阵遇到了好几个这样的情况,学习了。

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可是实际情况是蜡块都放在-20度啊,为什么呢?是操作不规范么?

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