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求助 关于甲苯胺蓝染色肥大细胞的具体步骤

求助 关于甲苯胺蓝染色肥大细胞的具体步骤

常规脱蜡至水   二甲苯五道  3-5min 100% 两道 95% 两道  80% 一道 70%一道  30%一道 各 3-5min  蒸馏水 一道 3-5min  甲苯胺蓝 30min  水洗  (用水冲掉  开始的时候是流水冲洗2-3min 后来改成 只是把玻片表面的染液冲掉即可) 分色  水洗 (同上个水洗) 晾干或者烘干  二甲苯两道 各 5min   封片

做了很多次了  开始是 0.5g甲苯胺蓝  100ml水  0.5ml 冰醋酸  99.5ml 水  57度染色30min  冰醋酸分色5min  染出来什么都没有





后来用了另一种方法  0.5 mol/L 盐酸配制的 0.5%甲苯胺蓝, 调 pH 值至 0.5.  甲苯胺蓝染色 30 min, 充分显示肥大细胞; 95%酒精分色, 纯丙酮脱水两次各两分钟                  , 二甲苯透明,   中性树胶封片  
还是不行啊  


各位老师 给点意见吧  好像还有一种用高锰酸钾的方法  实在不行就得试试了

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甲苯胺蓝-肥大细胞染色
1、切片常规脱蜡至水。
2、0.5%甲苯胺蓝(0.5g甲苯胺蓝+100ml蒸馏水)染色30min。
3、稍水洗。
4、0.5%醋酸分化,直至胞核和颗粒清晰(在显微镜下控制)。
5、稍水洗,吹干。
6、二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项:
1、显示肥大细胞最好用Cannoy固定液。
2、甲苯胺蓝染色后不能用低浓度酒精脱水、否则会退色,
3、用滤纸将玻片上水吸干,再用95%酒精分色。
4、分色后快速入95%酒精、无水酒精、二甲苯,时间不能过长,防止继续脱色。
5、甲苯胺蓝室温可保存两年。
6、可改用硫堇进行染色。
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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