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一个可能很简单的HP染色问题

一个可能很简单的HP染色问题

不知道各位同行是用什么方法染HP的?
最近一个月,我们的HP染色出现了问题,我们使用的是吉姆萨染色,胃镜固定液是95%酒精,常规脱水(脱水第一步,不使用福尔马林,直接低浓度酒精!),常规脱蜡,水洗进染料。
问题出现:  吉姆萨染色,染出来片子很淡,颜色上不去,染久了又泛红,幽门螺杆菌在强阳性下,依稀可见。

探索过程:  吉姆萨试剂最近一个月,更换了产品(老的叫“吉氏”,两者分子式不同),余下的吉姆萨试剂已过期,试了之后还是一样淡。

更换染色方法:  使用亚甲蓝染色,亚甲蓝硼酸染色,厂家试剂,均未见好转!期间都使用全新脱蜡试剂,脱蜡水洗绝对能保障!

奇迹出现: 更换福尔马林固定后,染色奇迹般的上去了(无论用啥方法),不但时间缩短了,而且背景也干净了,幽门螺杆菌一条条杆状,历历在目!

再进谜团: 同张胃镜片子,在福尔马林固定后,HE染色出现问题,背景陈旧性,在胃组织周围一圈,出现淡黄色,颗粒状物,疑似色素沉着?!


提出问题:1,胃镜能否用95%酒精固定,对HP染色是否存在影响?
                  2,福尔马林固定后为啥出现这种情况?(在进脱水机之前,没有水洗,可是大标本也没洗呀?它怎么没有这种问题)
求论坛内大神们指点迷津,给个建议!
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回复

胃镜组织最好不用95%酒精固定,可选用95%酒精85ml十10ml甲醛十5ml冰乙酸或95%酒精90ml十10ml甲醛,最好用10%中性甲醛固定

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用10%中性福马林固定
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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回复 1# 的帖子

用95%的酒精固定,在低浓度酒精脱水,不会又问题吗?

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95%的酒精固定,本身就有问题。酒精只是在没有固定液的情况下才作为替代品,规范要求是10%中性福马林。95%酒精会使蛋白质凝固,使酒精无法渗透到组织深部。脱水再从低浓度开始,已经没有意义。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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