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介绍一种肺组织标本的简易固定方法
张 盛，王明伟，杨家莉，李 行
(湖北省肿瘤医院病理科)

随着肺癌分子检测的广泛开展，以及越来越多的靶向药物被应用于临床，对于标本质量的要求也越来越高。规范化的组织前处理是保证标本质量的前提，而其中标本的固定尤为重要。若标本固定不充分，会影响其常规染色，以及后续的免疫组化及分子检测[1]。肺组织由于其内充满大量的气体，在固定时，组织容易漂浮在固定液的最上面，从而导致上层组织固定不佳。在实践工作中，笔者通过橡皮筋用于各种切除类型肺新鲜组织标本的固定，取得较好的效果，现介绍如下。

1材料与方法

1.1 材料 选取术中快速室送检的肺新鲜组织标本。
1.2方法 ①待术中冷冻报告发放后，及时向组织标本袋中加入中性福尔马林固定液；②使用标本袋上面的密闭封条锁紧标本袋；③将封口处朝下，使肺组织标本漂浮于标本袋的上方；④将橡皮筋套在标本袋的中间位置，根据肺组织大小，调节橡皮筋的松紧度，孔径大小以肺组织无法通过为宜；⑤翻转标本袋，封口朝上，此时肺组织标本便悬浮于标本袋的中间位置（图1）。

2结果
如图1所示，采用本简易方法，可以使肺新鲜组织标本悬浮于固定液中，固定充分、及时，且不受任何挤压。

图1
肺组织标本悬浮于固定液中

3
讨论
众所周知，充分且及时的固定是组织前处理中最为关键的一步，也是保证标本染色和检测质量的重要基础[2,3]。肺组织标本，由于其组织内充满大量的气体这一特性，导致其固定时，漂浮于固定液的最上层，从而导致上层组织固定不充分。目前解决的办法主要有：①采用蜡板或脱脂棉覆盖在肺组织的上面，防止肺组织表面干燥的同时还可以促进固定液的渗入，但存在滑落的风险。②尽可能的排尽标本袋中的空气，使标本袋中处于真空状态，该方法虽能增加肺组织接触固定液的面积，但上层肺组织依然难以充分固定。③通过肺支气管灌注甲醛固定液的方法，既能保证肺组织与固定液的充分接触，又有利于肺内小结节的寻找，但不适用于肺楔切标本且操作相对复杂，对技术水平要求也较高[4,5]。另外，中国原发性肺癌诊疗规范（2015年版）中也明确指出，肺叶或全肺切除标本可从支气管注入足量固定液[6]。而采用本文介绍的方法，可以使包括肺楔切在内的各种切除类型的组织标本悬浮于固定液中，在不挤压肺组织的同时又保证了标本的充分固定，是对目前肺组织标本固定方法的一个重要补充。同时，本方法操作简单，无需特殊的设备和耗材，易于推广应用。
在采用本文介绍的方法时，需注意以下细节：①固定液的加入要及时且充分[7]；②标本袋中加入固定液后，挤压出少量空气后锁紧标本袋，可减少标本袋的表面张力，有利于后续操作。然后再轻轻挤压标本袋，通过观察是否漏气，从而判断密封条是否锁紧，防止固定液的外漏；③肺组织在固定液中的浮力和标本的体积大小有关，当组织较大时，可以适当加大其松紧度，但以标本不通过且中间留有空隙为宜；④在没有橡皮筋时，也可采用快速室的橡胶手套根部作为替代品。
总之，本简易方法用于肺新鲜组织标本的固定，操作简单，效果良好，值得推广应用。笔者认为，在通过支气管灌注固定液固定肺组织的基础上，结合本研究方法，可进一步改善肺组织标本固定效果，为后续的免疫组化及分子检测提供质量保证，从而更好的服务于临床病理诊断。

参考文献：
[1]《免疫组织化学检测技术共识》编写组．免疫组织化学检测技术共识[J].中华病理学杂志,2019(02):87-91.
[2] 苟继周，李晓星，孙 炎,等.组织固定对下游基因和蛋白分子检测的影响[J].临床与实验病理学杂志,2020,36(04):439-441.
[3] 杨 毅，陆江阳.标本固定时间对免疫组化染色结果的影响[J].诊断病理学杂志,2005(03):233-258.
[4] 邢 杰，赵瑞英，秦 钢，等. 通过支气管灌注固定肺组织在实际工作中的应用[J]. 中华病理学杂志,2019,48(06):475-476.
[5] 李 冰，刘同慎.肺组织切片的取材和固定新方法[J].生物学通报,2013,48(01):61-62.
[6] 支修益，石远凯，于金明.中国原发性肺癌诊疗规范(2015年版)[J].中华肿瘤杂志,2015,37(01):67-78.
[7] 陈志强，米贤军，陈 昂,等.不同体积的4%中性缓冲甲醛固定液对全自动免疫组化法检测乳腺原发性浸润癌Her2蛋白的影响[J].诊断病理学杂志,2017,24(09):709-711.

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