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为什么空白对照组出现阳性细胞

为什么空白对照组出现阳性细胞

这几天做了一批免疫组化. 大鼠脑部切片.用正常大鼠作为空白对照组.
     一抗浓度80.  双氧水和山羊血清都处理过.其他的步骤也都是常规的那种
     结果出来发现,空白对照组的切片上居然很多阳性细胞.

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内源性生物素的影响,选择用非生物素试剂盒。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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引用:
原帖由 caoliu713 于 2007-10-19 00:48 发表
这几天做了一批免疫组化. 大鼠脑部切片.用正常大鼠作为空白对照组.
     一抗浓度80.  双氧水和山羊血清都处理过.其他的步骤也都是常规的那种
     结果出来发现,空白对照组的切片上居然很多阳性细胞.
没有灌注?

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我做是是胸腹水的 也是这样的结果很另人头痛的
当今,社会把人分成了魔鬼和乞丐,我选择乞丐。

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空白

不知道你这种被检测的抗原在正常组织中会不会表达,应该看一下相关文献!若是在正常组织中不表达,可能是抗体特异性不好!可以用过量的抗原来做预吸收实验,从而检测抗体的特异性!若是预吸收后仍有染上细胞,则是抗体纯度不高造成的非特异性染色!
愿大家都能从中得到帮助

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引用:
原帖由 柳玉山 于 2007-11-17 11:16 发表
若是预吸收后仍有染上细胞,则是 则是抗体纯度不高造成的非特异性染色!...
不一定。

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要不就换一下对照实验的片子,就长做的免疫组化试剂有的时候确实也有在不应显色的细胞里显色,要不就是试剂的特异性不强,要不就是内源性生物素的影响。免疫组化的人为因素影响的特大。

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引用:
原帖由 shanghainese 于 2007-11-17 13:19 发表

不一定。
能具体解释一下吗!谢谢!

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