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请教:Masson染色全变成蓝色的原因

请教:Masson染色全变成蓝色的原因

最近一直在做Masson染色:
使用的即本网站的方法。最初做的很好,出来的片子颜色鲜明,对比度好,该红的红,该蓝的蓝。
后来又做了几张片子,出现红色一入磷钼酸就掉色特别厉害的现象。我感觉是酸性品红的原因。
现在面临着一个困惑:
为什么有的片子对比度好,有的片子整体都变成了蓝色?(感觉蓝色将红色覆盖了)
那就说明我的试剂没有问题。问题出在哪里呢?
做Masson染色,到底是哪一步导致了这种现象的发生?



请大家帮助!

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Masson三色染色法
试剂配制:
(1)丽春红酸性品红液:
                      丽春红        0.7g
                      酸性品红      0.3g
                      冰醋酸        1ml
                      蒸馏水        99ml
先配好1%醋酸溶液后,分别溶解丽春红或酸性品红。
(2)亮绿液:
            亮绿                    1g
            冰醋酸                  1ml
            蒸馏水                  99ml
(3)苯胺蓝液:
              苯胺蓝                2g
              冰醋酸                2ml
              蒸馏水加至            100ml
(4)Weigert铁苏木素液:
     甲液:苏木素                   1g
           95%酒精或无水酒精        100ml
     乙液:29%三氯化铁水溶液        4ml
           纯盐酸                   1ml
           蒸馏水                   95ml
临用前取甲、乙两液混合即可,24小时内使用有效。
染色步骤:
1、切片脱蜡至蒸馏水
2、Weigert铁苏木素染色5-10分钟
3、流水稍洗
4、盐酸酒精分化
5、流水冲洗数分钟
6、丽春红酸性品红液染色5分钟
7、蒸馏水稍冲洗
8、1%磷钼酸水溶液处理5分钟,可在显微镜控制下见肌肉纤维呈红色,胶原
纤维呈淡红色即可
9、不经过水洗,直接用苯胺蓝液或亮绿液染5分钟
10、1%冰醋酸处理1分钟
11、95%酒精、无水酒精脱水
12、中性树胶封固
染色结果:
胶原纤维呈蓝色(苯胺蓝染)或绿色(亮绿染),肌纤维、细胞质和红细胞
呈红色,细胞核呈蓝褐色。
注意事项:
每个步骤可在镜下控制染色效果

(试试这个,此法为教材标准上的!)
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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回复 1# 的帖子

要不丽春红染的不好,要不就是在1%磷钼酸中分化时间过长。

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我是做大鼠肺组织masson。有的片子很好染,时间长点短点都很漂亮。有的就不行,同一批的肺组织切片不会出现相同的效果,不像HE那么好控制。不知道是什么原因。
染得过程中,我觉得好像丽春红确实着色淡,效果就很不好。

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现在我掌握masson染色技术了。

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呵呵,特染其实是很简单的,多注意操作的注意事项!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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我之前也做masson,也是染出来就一片蓝色,红色的就只有一点,这是怎么回事呢

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求助:masson染色 底色偏蓝

你好,我想请问一下你上述的问题解决了没?我是新手,最近也在做小鼠肺组织的masson染色,也老是出现底色偏蓝的现象,若你已经解决的话,麻烦可不可以告诉我你的解决方案啊?不胜感激!

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方法和书上说的一样。只不过我觉得染色时间得自己把握。具体的时间我都是在显微镜下控制的。每一步的颜色,我都会在显微镜下看一下。结果就不错的。颜色很鲜艳,红蓝对比很清晰。
声明:我也是没人教,自己摸索着做的。也是按书上一步一步做。因此以上经验仅供参考。

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求帮助

哪位老师能给我介绍本初级技师的考试书籍!

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