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各位老师,有没有做过铜染色?请教各位老师铜染色法。

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Howell’s 红氨酸染色法 用于铜沉积物染色

试剂配制:
1.  0.1% 伊红Y-乙醇液。
2.  10%醋酸钠水溶液。
3.  红氨酸贮存液
  红氨酸             50mg
  无水乙醇           50ml
4. 红氨酸工作液
  红氨酸贮存液       2.5ml
   10%醋酸钠水溶液    50ml
固定:10%中性缓冲福尔马林或其它固定液
切片:石蜡切片5微米

染色步骤

1.  石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.  红氨酸工作液37过夜。
3.  70%乙醇15分钟。
4.  无水乙醇6小时。
5.  对比染色,淡染醇溶性伊红。
6.  水洗,无水乙醇脱水。
7.  二甲苯透明,中性树胶封固。

结果

-绿色
黑色素颗粒,细胞质-粉红。

说明:
1.  设阴性和阳性两方面对照进行染色控制。染色时偶尔会失败,阳性对照利用已知有肝豆状核变性(Wilson’s病)的肝脏切片比较合适,如果作不到着一点,铜  染色可能会在慢性活动性肝炎中出现。
2. 铜与红氨酸形成螯合物,和其它一些金属也能形成螯合物。其中钴,镍可以和铜混淆。因此加入醋酸钠能够阻断它们。
3. 红氨酸也称为二硫代乙二酰胺;乙二硫二胺或二硫代草酰胺。

这个方可以。

[ 本帖最后由 ylzhao 于 2011-10-5 19:43 编辑 ]

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