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CD133抗体

CD133抗体

那位老师做过CD133抗体,我买了德国美天旎公司浓缩型的,我是做得脐血提纯的干细胞,我始终是阴性的。1、标本来自人的脐血提纯干细胞
2、干细胞涂片
3
95%乙醇固定60分钟;
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60考半小时。
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、高压EDTAPH=9.0)修复1~1.5分钟。
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、蒸馏水2 min
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3%H2O2孵育10 min
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蒸馏水3次各2 min
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、一抗(CD133)孵育(抗体稀释液配制,滴度151101201501,100湿盒)
4
过夜(同样稀释度,同时以做过37一小时)。
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PBS清洗标本3次各2 min
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、二抗工作液孵育基因公司兔/鼠通用型试剂盒37 30 min
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PBS清洗标本5次各2 min
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DAB显色(避光,镜下观察至棕色)约10~15min
备注:组织脱蜡到水,高压EDTAPH=9.0)修复1~1.5分钟以下步骤相同。

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会不会是大鼠和小鼠的不同导致的?

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其实这个过程只要是做别的是成功的,那就没什么大问题。感觉还是来源有问题。

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再有问题找Miltenyi.

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我是人来源的标本,以前去在中山金桥买的CD133可以做出来,他们家不买这个抗体了,我就换了这家公司。浓缩型的 就是怎么找比例都不行。一抗说明书上是mouse来源的IgG1,二抗我用的是基因公司兔/鼠通用型的

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同一批中其他的抗体没有问题,都可以做出来,

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我用组织结肠癌的图片
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