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请教版主:小老鼠牙体牙周组织切片免疫组织染色,硬组织掉片怎么避免?

请教版主:小老鼠牙体牙周组织切片免疫组织染色,硬组织掉片怎么避免?

我最近接了一批小老鼠的牙体牙周组织切片(DETA脱钙,防脱载玻片片捞片),做免疫组织化学染色,所有切片的牙本质基本都漂片或皱起,同批次的睾丸切片没有出现脱片现象。
我切片后烤片30分钟,4度冰箱放置,染色时,再放入72度烤箱30分钟后脱蜡。
请问各位有高招吗?
谢谢!!!

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对于骨组织的免疫组化掉片问题,我们科室也没有太好的方法,鉴于脱钙造成抗原丢失等等,我们一般避免了骨组织的免疫组化,有好的方法的老师们可以指点下!
安守本分,沉默是金!!!

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1、不知EDTA脱钙后是否充分水洗??因EDTA配制时需要pH至弱碱性才溶解,因此脱钙完毕应水洗充分。如人为的使组织偏碱性容易掉片。
2、可延长烤片时间,70度30分钟后,60度烤箱24--48小时,备用,科研应该不赶时间吧。
    我们科临床免疫组化检测切片都烤片过夜。

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