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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

[这个贴子最后由dingwei在 2003/10/20 09:40pm 编辑]

        基底膜 、 中性粘液、   糖原  (P.A.S.)法
碱性品红 1 g 活性炭 2 g
当量盐酸 20 ml 偏重亚硫酸钠 1.5 g
Schiff试剂配制:
1. 碱性品红1g,放入200毫升蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。
2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20毫升。
3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。
4. 加活性2 g,摇晃,过滤,以无色为****。棕色瓶,4℃冰箱保
   存。
染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 1%过碘酸水溶液5~10分钟。
3. 蒸馏水洗多次。
4. Schiff液10~15分钟。
5. 流水冲洗10分钟。
6. 苏木素复染。(1~2分钟)
7. 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
结果:基底膜 、中性粘液、糖原红色。
注意:1.做糖原染色阴性对照片用淀粉酶消化处理。
      2.糖原染色容易水解,取材标本最好新鲜,不要经过水洗,最好用苦味酸酒精固定。
      3.固定液用中性福尔马林为佳。
      4.如Schiff液发红, 再加入少量偏重亚硫酸钠,使液体颜
      色变清后又可使用.

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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

请教丁老师:1%的高碘酸水溶液配法:高碘酸1克,双蒸水99毫升.是否正确.
     1%的高碘酸酒精2溶液:高碘酸0.4克,1/5克分子醋酸钠 5毫升, 95%酒精 35毫升,
     双蒸水10毫升.是否正确.
       PAS染色用高碘酸的水溶液好还是酒精溶液好呢?

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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

没试过,你可以把二种方法对比一下。1%的高碘酸水溶液配法应该没错。

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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

丁老师:苏木素复染得目的试什么呢?如果单是多糖是否可以不用苏木素复染!

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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

苏木素在这里是衬染的作用,让细胞核些许着色,这样使PAS阳性结果更容易判断!

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丁老师:我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红,是否有问题?染出的片特红。染液该如何改进?

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此图很漂亮啊,不愧为浙一技术一把手

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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

引用:
下面引用由2003/09/26 11:02am 发表的内容:
丁老师:我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红,是否有问题?染出的片特红。染液该如何改进?
可以是偏重亚硫酸钠不纯了,可多加一点试一下。

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基底膜、中性粘液、 糖原染色法 (P.A.S.)

丁老师:我往100ML SCHIFF  液中加入1克偏重亚硫酸钠,结果还是一样,染片过程中大约十分钟后染液就变红。

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你的偏重亚硫酸钠可能已经失效了。买新的了。

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