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非特异性着色的原因

非特异性着色的原因


   1.抗体稀释度过高,导致切片深染。
      现象:分不清是那些细胞着色。
      解决方法:找出****的稀释比。
   2.抗体不纯,或抗体特异性不强,交叉反应较多,或抗体表达      
      较弱。如现在新出的很多癌基因,大多有这类情况。
      现象:阳性细胞和阴性细胞都着色,只是阳性细胞着色略强
      一些。像这类情况很难有好的办法解决,可找一个背景着色
     较浅的试剂盒试一下,或用胰酶消化,或用微波修复。
  3.抗体本身的特异性异常表达。从理论上说一种抗体只能与其相
     应的抗原起免疫反应,但经过长时间实验以后,发现很多组织
     都有“例外”的表达,目前大多用细胞的分化不同阶段其抗原
     性有相应的变更来解释,可能还有很多我们目前不知的原因。
     这种情况我们就没办法解决了。
  4.抗体孵育时间过长,或孵育温度过高,导致着色过深。不能
     补救。

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