返回首页 | 病理技术专题 | 病理资讯 | 病理图库 | 病理技术精英 | 同行交流 | 技术会诊 | 点滴经验 | 常规切片 | 特殊染色 | 分子免疫 | 细胞园地 | 电镜技术 | 收藏本站
 34 1234
发新话题
打印

请教:PAS染色高手

请教:PAS染色高手

PAS染色不上色是什么原因呢?试剂是从公司买的,以前用还很好用,最近几次染色颜色都很浅或者几乎没颜色,是不是温度的问题,以前我在室温染半小时,颜色很好。雪夫试剂是应该放在4℃保存吗?用之前恢复到室温。还和什么因素有关呢?请大家帮我分析一下吧,谢谢了
认真做事,踏实做人!fighting!!

TOP

PAS染色不上色多半是雪夫氏试剂失效,雪夫氏试剂有失效期,雪夫氏试剂质量好可贮存1年,质量不好的3个月甚至更少.无论公司购买还是自己配制随着时间推移都会失效.冷冻保存可以延长雪夫氏试剂的有效期.

[ 本帖最后由 ylzhao 于 2007-1-25 12:52 编辑 ]

TOP

哦,是这样啊,谢谢了,请问有雪夫氏试剂的配方吗?我想自己配着试试看
认真做事,踏实做人!fighting!!

TOP

试剂配制:
(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。
(2)Schiff氏试剂。
碱性品红                                          1g
蒸馏水                                             200ml
1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml) 20ml
偏重亚硫酸钠                                  1g
碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。

TOP

回复 #4 ylzhao 的帖子

谢谢了,我要自己配置=)
认真做事,踏实做人!fighting!!

TOP

回复 #4 ylzhao 的帖子

版主,我按照你的方法配制了PAS,但是失败了,配完后避光放置了两天溶液是深棕色,加了活性碳也没什么变化,过滤之后还是深棕色,是什么原因呢,请教一下.谢谢了
认真做事,踏实做人!fighting!!

TOP

配制方法不会有问题,配制时选用纯度高的试剂.

TOP

我看了试剂包装,都是分析纯的,用超纯水配的
认真做事,踏实做人!fighting!!

TOP

可以参考杜卓民主编的<最新实用组织学技术>中关于糖原染色的方法,里面有详细的介绍关于Schiff试剂的配制方法.个人认为配好后冷却至室温,加入活性炭后就可以马上过滤了,不用避光2天后再过滤.具体请参考杜卓民老师书中的方法,我按书中的方法配出的试剂相当好用,而且在4度可以保存3个月以上.

TOP

用冷配法比较好。所用东西都一样,不过我们使用蒸馏水的量是174毫升,亚硫酸氢钠是3.8克。当量盐酸是1毫升盐酸加蒸馏水到12毫升。按前面那个配方依次加入容器。最好是棕色瓶,实在没有,可以用纸包起来。剧烈震摇2小时,加活性炭1克,震摇十分钟到半小时,过滤便可使用。活性炭不可加过多,亚硫酸氢钠不能少加。滤出颜色如为淡黄色,是活性炭吸附时间太短。最重要的是所有器具必须用蒸馏水冲洗干净。试剂之所以会失效,主要是因为亚硫酸氢钠的那种略刺鼻气味的消失或减弱。如果有兴趣,就试试看吧。

TOP

 34 1234
发新话题