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标题: 脱片严重！该怎么办？ [打印本页]

作者: 永远 时间: 2010-5-25 08:43 标题: 脱片严重！该怎么办？

我平常用自己做的涂胶片，发现脱片有点严重后，换了从公司买来的片子，但是，脱片更严重了，我在想是不是组织处理的问题，但是昨天做了省里寄来的质控的片子，还是会掉，让人很郁闷！是不是我修复过程中有什么问题？我修复的过程是：我用的是煮沸的方法，电磁炉加热，因片子少，锅内还放有一个不锈钢的杯子，锅内水开后，放入不锈钢杯子，盖上锅盖，待冒气后，计时二十分钟，关火后再保温十分钟。不知道这样的过程是不是有问题，希望各位老师不吝赐教！这个问题现在真的是让我很困扰

作者: scj1233 时间: 2010-5-25 08:51

现在修复方法都是用高压锅，冒气后在煮两钟

作者: 永远 时间: 2010-5-25 09:11

我们现在片子少，要是锅内加个不锈钢杯子的话，还能上高压么？

作者: 永远 时间: 2010-5-25 09:12

直接把片子放在锅内的话，对我们来说觉得有点浪费修复液

作者: 永远 时间: 2010-5-25 09:13

现在已经很容易掉片了，要是加高压，会不会掉的更厉害呀？

作者: scj1233 时间: 2010-5-25 09:23

可以放耐高温架子，掉片原因多种，切片厚度，烤片时间等

作者: 永远 时间: 2010-5-25 09:30

切片用的2切的，不过机器有点老了，可能切出来会有三微米，烤片是65°，3小时

作者: scj1233 时间: 2010-5-25 09:32

我用的是90度，半小时就好，不掉片

作者: 永远 时间: 2010-5-25 10:05

谢谢，下次我试试

作者: dingwei 时间: 2010-5-25 15:30

用90度，对抗原有影响，不应该用。
脱片主要是组织处理过程中福马林含量高（如用AAF液，这种固定液不知是那个想出来的，很害人，说是又可以固定，又可以脱水，中国人尽想一些又要马儿跑得快又要马儿不吃草鞋的事，是不可能的），固定后要水洗，这样就不容易脱片了。其次脱水不彻底或过了，也会脱片。
你们省质控寄来的片子也不一定是好片子。
用高温修复比水煮法好，稳定、阳性率高。

作者: scj1233 时间: 2010-5-25 15:52

问下丁老师多少温度烤片适宜，这温度也是我摸索出来的，感觉快方便

作者: dingwei 时间: 2010-5-26 09:47

60-65度4小时。

作者: zxl216216 时间: 2010-8-23 14:16 标题: 回复 12# 的帖子

我们最近在做石蜡切片免疫荧光，大鼠脑片和胰腺，相同的方法，脑片会脱片，胰腺不会，还请各位老师指导。

作者: promotion 时间: 2011-1-12 14:35

第一：用正电荷的载玻片，
第二：蜡块的蜡要纯，不能有大量的福马林，
第三：切片厚度在2微米，
第四：烤片是75°，2小时。
以上四点，应该不会脱片，再脱片，要考虑组织是否脂肪太多了。

作者: 95051 时间: 2011-3-2 15:40

但是如果烤片温度少于85度，烤半个小时都容易掉片，为了当天出片子，经常会上到90度，结果也不错。有时下班前切好片放在60度烤箱内过夜，这个效果就更好了。

作者: gao314159 时间: 2011-3-3 09:34

最好和修复液同时加热，你那种方法突然受热就容易热胀冷缩

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