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标题: 组织掉片问题，多聚效果怎么样？？？ [打印本页]

作者: sangerbio 时间: 2010-6-15 16:19 标题: 组织掉片问题，多聚效果怎么样？？？

组织掉片问题，多聚效果怎么样？？？

作者: lingfsu 时间: 2010-6-15 16:22

我们实验室使用的是正电荷防脱载玻片（superfrost plus），玻片用的是正电荷吸附形成共价键的技术，比普通的涂层技术要好很多，做免疫组化和原位杂交的效果非常好，普通多聚载玻片基本都要脱片，因为进行高温高压，微波加热基本都脱片。

作者: sangerbio 时间: 2010-6-15 16:22

做免疫荧光用什么载玻片

作者: lingfsu 时间: 2010-6-15 16:23

我们做的这个实验，一直使用的是进口的正电荷防脱载玻片（superfrost plus），这个玻片玻璃本身透光率高，非常适合做免疫荧光实验。它的不容易脱片，因为他用的是正电荷吸附形成共价键的技术。试过的普通防脱玻片基本都不行，还是容易脱。

作者: sangerbio 时间: 2010-6-15 16:24

做原为杂交用什么载玻片？

作者: lingfsu 时间: 2010-6-15 16:24

我们实验室一直使用的是进口正电荷防脱载玻片（superfrost plus），这款玻片无RNA酶，很适合原为杂交。它通过正电荷吸附的技术，可以让细胞，组织不会脱落。

作者: sangerbio 时间: 2010-6-15 16:25

求推荐效果较好的进口防脱载玻片代理,知道的请告诉下

作者: lingfsu 时间: 2010-6-15 16:25

国外的实验室一般使用正电荷防脱载玻片（superfrost plus），使用的是正电荷吸附形成共价键的技术，效果比蛋白包被方法好的多，而且背景很小。这个是现在能买到的最好的防脱载玻片了，就是价格有点贵。
Fisher和VWR都在产，文献里一般也就这两个牌子

作者: showtime 时间: 2010-6-17 18:52

普通组化就用多聚赖处理的片子好了
阳离子片还是在原位杂交时用吧，毕竟这种片子比较贵

作者: colin 时间: 2010-6-21 17:46

目前一直用的多聚赖氨酸以1：7－8稀释，还没有出现过掉片的问题！

作者: flyaqmt 时间: 2010-7-14 20:14

我觉得脱片的主要原因是切片后没能及时烤片，如果烤的好的话，片子不会脱，再就是蜡块处理的不好。
我用的是涂多聚赖氨酸的，也用过APES的，我们自己的蜡块都能行，从来没脱过（微波修复）。但是下边来会诊的有几个地方的蜡块就脱的特别厉害，后来再有这几家医院的蜡块，我就用买的世泰的免疫组化专用的胶片，就是成本高了些。

作者: siliang420 时间: 2010-7-22 01:40

顶10楼，我以前在医院做的时候就是这样处理组化的玻片的，常规的从来没有发生过掉片问题。如果常规老掉，又不想增加成本来控制这个，那么我建议你开足你的烤箱，80摄氏度20分钟，再掉俺也没辙了

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