我是安徽某学校学免疫的研究生，也需要做病理切片，但是技术很不过关，有时送安医附院请人帮忙切片，那片子真让我们羡慕啊。今天看了该论坛的很多帖子，受益匪浅，非常感谢！

以下说说我们实验室坐病理切片遇到的问题：

1、小鼠肝组织或脾脏脱水包埋后，切之前也放入冰箱冷冻10min左右，切片时感觉组织非常脆，有时组织都成粉末了，必须用湿纸巾贴在组织面才能切完整。不知道这个问题是不是由于脱水过多造成的？感觉组织里没有浸蜡，切出来的片子摊片时组织和腊很容易分开。

2、问些小问题，做冰冻切片时，切过后立即用甲醇固定后，染色时需要用缓冲液洗洗吗？一般就是PBS么？另外冰冻切片要保存该如何操作呢？是固定后保存还是固定前保存？

3、做组化时，用3%H2O2去除内源性过氧化物酶有时有大量气泡，正确的做法应该是什么呢？

谢谢大家，不懂的问题还有很多，还望不吝赐教。