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标题: 请教热水返蓝的利弊 [打印本页]

作者: 赤脚医师 时间: 2010-7-7 15:33 标题: 请教热水返蓝的利弊

今天用热水返蓝的时候，因为手头还有别的事，居然忘记关水龙头，70度左右的热水一直流了大约三四分钟，发现后立马将热水换成冷水，又冲了大概一分钟，这才发现片子很蓝，迅速分化，再返蓝，有所改观。照说对片子多少总有些影响，比如说细胞膨大；要是没有再次分化、返蓝，而是换成冷水后直接就过伊红，片子会不会红蓝不均？热水返蓝毕竟有它的局限性，比如时间长（尤其对于冰冻快速标本来说），但同时也降低了成本，至于碳酸锂和氨水没试过，效果如何？望朋友们指点！

作者: dingwei 时间: 2010-7-7 17:02

热水返蓝是一个很好的方法，热水返蓝速度很快，所以，经热水返蓝后，还要经过一段时间流水冲洗，把切片上残留的酸彻底冲干净，以利于切片长期保存不褪色。
冰冻切片热水（水温只要60度左右就可以了）返蓝速度也很快阿，只要5-10秒就可以了，怎么会很长呢？用热水近蓝后染依红时间很短，只要1-2一秒即可，而用氨水返蓝，不仅需要长时间把氨水冲干净，而且染依红时间也较长。

作者: 赤脚医师 时间: 2010-7-7 22:48

也许是习惯所致，我们一直用的是热水返蓝。常规制片分化后冷水冲洗5-10秒，尔后换60度左右热水中蓝化1分钟，再用冷水缓慢冲洗2分钟；冰冻切片和丁老师说的差不多，但我们都习惯热水出来后再进冷水冲洗片刻。看来在保证将酸冲洗干净的前提下，返蓝时间还可以缩短！氨水不行，那碳酸锂效果如何呢？

作者: dingwei 时间: 2010-7-8 07:59

氨水和碳酸锂都是碱性液体，其原理是一样的。

作者: 赤脚医师 时间: 2010-7-8 21:05

看来还是用热水比较好，谢谢丁老师指教！

作者: yangpntz 时间: 2010-7-13 21:54

引用:

原帖由 dingwei 于 2010-7-7 17:02 发表
热水返蓝是一个很好的方法，热水返蓝速度很快，所以，经热水返蓝后，还要经过一段时间流水冲洗，把切片上残留的酸彻底冲干净，以利于切片长期保存不褪色。
冰冻切片热水（水温只要60度左右就可以了）返蓝速度也很快 ...

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请教丁老师，为什么用热水冲会有酸残留呢？

作者: 又红又亮 时间: 2010-7-13 22:08

引用:

原帖由 yangpntz 于 2010-7-13 21:54 发表
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请教丁老师，为什么用热水冲会有酸残留呢？

用流水将之前分化用的盐酸冲走，和水的温度无关

作者: 赤脚医师 时间: 2010-7-13 22:56 标题: 回复7#

是

作者: yangpntz 时间: 2010-7-14 20:08

引用:

原帖由 又红又亮 于 2010-7-13 22:08 发表
用流水将之前分化用的盐酸冲走，和水的温度无关

我们都是用不分化的，所以不存在酸不酸的，还以为热水冲了会变酸，所以才会有这样的疑问，见笑了。

作者: 又红又亮 时间: 2010-7-14 21:41

引用:

原帖由 yangpntz 于 2010-7-14 20:08 发表

我们都是用不分化的，所以不存在酸不酸的，还以为热水冲了会变酸，所以才会有这样的疑问，见笑了。

不分化，核和浆不都成蓝蓝的，怎么看？

作者: 赤脚医师 时间: 2010-7-15 22:19

引用:

原帖由 又红又亮 于 2010-7-14 21:41 发表
不分化，核和浆不都成蓝蓝的，怎么看？

苏木素染色时间短，胞浆没有上色，分化意义不大！

作者: 善意的谎言 时间: 2010-7-16 23:56

我们也不分化，用的是改良的吉氏苏木素
效果不差啊！

作者: 又红又亮 时间: 2010-7-17 16:30

引用:

原帖由 善意的谎言 于 2010-7-16 23:56 发表
我们也不分化，用的是改良的吉氏苏木素
效果不差啊！

习惯问题

作者: paxson 时间: 2010-8-7 02:15

不分化的效果没有分化的效果好。

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