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标题: [求助]请教丁老师有关巴氏染色法的问题 [打印本页]

作者: zhengxingyin 时间: 2003-5-14 10:23 标题: [求助]请教丁老师有关巴氏染色法的问题

丁老师：
你好！
我是一个病理新手，可我现在急需巴氏染色法及丹宁酸染色的资料，可由查不到，只好来这里想请你指点一下。谢谢

作者: 天竹石 时间: 2003-5-15 15:42 标题: [求助]请教丁老师有关巴氏染色法的问题

什么啊，这些一般的病理技术书上都有啊！怎么会查不到呢！

作者: mbw200318 时间: 2003-5-19 22:30 标题: [求助]请教丁老师有关巴氏染色法的问题

巴氏（Papanicolaou's,Pap）染色法
一、染液配制
1、Harris苏木精配制方法（1000ml）
苏木精       5g
95％酒精       50ml
亚明矾（硫酸铝氨） 100g
蒸馏水加至          1000ml
黄色氧化汞          2.5g
先将苏木精溶解于95％酒精中，同时将亚明矾（媒染剂）溶于蒸馏水中，徐徐加热至沸使之完全溶解。然后将苏木素溶液缓缓加入，加热至沸，立即挪开火焰。再将氧化汞粉末加入，同时搅拌，当溶液变为深紫色时，表明苏木精已经氧化成苏木紫，即应迅速将盛液体的器皿置于冷水中冷却，以免苏木紫过度氧化而出现棕色沉淀。
配制完毕，将溶液置入棕色小口瓶中，瓶口塞棉花或纱布，暂不封闭，以便溶液内剩余的苏木精慢慢氧化。
2、桔黄G6液：取桔黄G60.5g溶解于5ml蒸馏水中，完全溶解后加入100％酒精至100ml，再加入 0.015g（少许蒸馏水溶后加入），过滤后使用。
3、EA36溶液配制：为三种染料配合而成
先配制原液（常备液）
淡绿（Light green）：0.5g（原方法为0.1g，经多次配制并实际应用效果不理想，故改为0.5g 染色反应佳），溶在5ml蒸馏水中，可温水浴使之完全溶解，然后把100％酒精加至100ml。
伊红（eosin）：0.5g溶于5ml蒸馏水，然后加100％酒精至100ml。
俾士麦棕（bismark brown）：0.5g溶于5ml蒸馏水中，然后加100％酒精至100ml。
配合方法：（100ml EA36液）
淡绿常备液       45ml─┐
伊红常备液       45ml  │混合液
俾士麦棕       10ml─┘
磷钨酸0.2g溶于少许蒸馏水中加入到混合液中，然后再加碳酸锂饱和溶液一滴。
二、染色步骤
·将固定后涂片置入水中（蒸馏水或自来水）3-5分钟。
·Harris苏木素液3-5分钟。
·水（蒸馏水或自来水）漂洗2-3次。
·0.25％－0.5％盐酸水溶液，浸1-3次。
·自来水，浸洗1-2次。
·稀碳酸锂（100ml蒸馏水中加碳酸锂饱和液一滴）涂片返蓝为止。
·依次置入70％→80％→95％酒精，各2分钟。
·桔黄G6液，0.5-1分钟。
·95％酒精Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各1分钟。
·EA36液，3-5分钟。
·95％，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各1分钟。
·100％酒精Ⅰ、Ⅱ各1分钟。
·二甲苯Ⅰ、Ⅱ各2-3分钟。
·树胶盖片封固。

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