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标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片 [打印本页]

作者: xiaolizz7471 时间: 2003-5-18 09:58 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

我的步骤如下：取鼠脑视交叉前后3mm置于4%的多聚甲醛固定24小时，梯度脱水，二甲苯透明，浸蜡包埋（蜡的熔点为60度），5um切片，可是脱蜡时仅一道就掉片了，请帮我看一下哪出了错，有什么办法？拜托拜托

作者: 老山 时间: 2003-5-18 12:03 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

1。载物片必须严格经过清洁液、乙醇处理后充分水洗，烤箱烤干。
2。防脱片处理如：APES等方法
3。切片应烤干，但温度不能太高，这一点很重要。
4。水洗时动作要轻。

作者: xiaolizz7471 时间: 2003-5-18 12:11 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

我用的是多聚赖氨酸处理的玻片，不行。APES我试一下，烤片的温度多少合适，我现在是80度15分钟，以前也用过60度1小时。

作者: dingwei 时间: 2003-5-18 22:36 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

APES比多聚赖氨酸好一点，烤片的温度60度4-8小时。

作者: xiaolizz7471 时间: 2003-5-18 23:02 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

谢谢

作者: 奇刺 时间: 2003-5-20 20:21 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

告诉你一个可怕的方法，哈哈。就看你敢不敢试试了，书上都不是这么写的。到处违反原则。
1、找新载玻片，如果要照相的话用蒸馏水洗一下，如果不照相的话什么处理都不用。
2、切片完成如果5-8个um这么厚的话，那就把烤箱温度提高到85度（摄氏度）（居然还有人敢提高到100度5分钟，我胆子没这么大，没敢试），10分钟就好，时间可不能长哦。玻片上什么都不用涂。哈。
3、这是玩笑，也是所有书本上都不敢这么写的方法，不过我真的试过，好象成功了。而且好象成功了不止一次。

作者: shanghainese 时间: 2003-5-22 07:21 标题: 大鼠做免疫组化的脑片如何不掉片

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