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标题: 请教丁老师 [打印本页]

作者: 糊涂蛋    时间: 2010-11-10 07:27     标题: 请教丁老师

网染的氨银液已配一周还好用吗,需注意些什么,为什么我染的片子镜下可见黑色的银渣,是氨水不够引起的吗.谢谢丁老师.
作者: dingwei    时间: 2010-11-10 07:54

氨银液配好后放4度冰箱可保存3周。黑色的银渣有可能氨水不够。
作者: 糊涂蛋    时间: 2010-11-10 13:48

丁老师,请问配时氨水的量该怎样掌握呢,还有氨银染时是浸染好还是滴染好,调色时间需5-10分吗,谢谢.想把片子染好所以很唠叨,请见谅,平时染的很少还请多指导,染时需要注意什么,谢谢.
作者: dingwei    时间: 2010-11-10 20:16

配制时滴加氨水,边加边摇晃,直至黑色沉淀基本没有(不必全部没有)。
氨银染时是浸染比滴染好。但新鲜配制一般区别不大,玻片要干净,不要用硅化玻片或上胶的玻片。
调色时间一般只需2-5分钟。主要看氯化金的浓度和新旧度。
网染最重要的是玻片、器皿要干净;铁明矾不能失效;银氨液出来后用蒸馏水洗要快,一浸就可以了,马上放入福马林液内。其它好象没什么了。
作者: 糊涂蛋    时间: 2010-11-10 23:16

谢谢丁老师,刚从科里回来,今晚染了两片,但效果都不是特理想,主要是背景不均匀,不知是氧化的时间过了,还是调色的原因,有的地方连核都银染上了,有的地方又染浅了,.是不是和我滴染有关,想做好没那么容易啊,氧化用高锰酸钾0.25的浓度,5分钟,调色用0.1的,时间自己看.不知丁老师在染时氧化的浓度和时间是多少,丁老师快快看到我的回复啊,希望一觉醒来就有答案了,别笑我懒,是我太需要答案了,期待.还有糖原染色的背景也偏红了点,也和高碘酸的浓度和时间有关吗,我用的浓度2.5,5分钟,需用偏重亚硫酸吗.啊,太多想问的啦.
作者: dingwei    时间: 2010-11-11 07:27

没有明确的答案,有些东西需要自己去找,原因有很多,很难说一定是什么。网染连核都染上,也正常,不看这些,主要是看网状纤维有没有染好。糖原染色的背景也偏红了点,也没关系,背景总有一点,只要淡、反差明显就行。
作者: 糊涂蛋    时间: 2010-11-11 07:44

太谢谢了,我会再试试,糖原需用偏重亚硫算吗.
作者: dingwei    时间: 2010-11-11 09:14

尽管差异不大,但用总比不用好。
作者: 糊涂蛋    时间: 2010-11-11 22:52

好像要染的漂亮很难,和太多因素有关,平时太少做而且要求也没这回来的高,越来越没信心,不是背景深就是银染的不均,好累人,不关身累,心也累.问提还存在啊.
作者: guwujiangxia    时间: 2010-11-12 00:18

请教丁老师,肝糖原染色时,同一批次染得片子,给药高剂量组部分动物肝脏肝细胞全部没有红色,而血管壁却可以看到红色,这样算染色正常吗?是动物本身肝糖原就消失了,还是染色不好导致?为什么血管壁又会着浅红色呢?期待您的指教!




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