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标题: 请问大鼠肾脏免疫组化 [打印本页]

作者: leecheul    时间: 2010-11-19 00:02     标题: 请问大鼠肾脏免疫组化

我近期做糖尿病大鼠肾脏icam-1的免疫组化,用sabc法(博士德)但是肾小管非特异性反应很强烈,我想要的肾小球表达倒是不强烈,在dxy里有人说是生物素系统检测肾脏肾小管都有表达,请问版主及做过这个经验的前辈请说出理由及解决方法,谢谢!!
作者: 病理幼儿园新生    时间: 2010-11-19 07:45

更换非生物素系统检测
作者: shanghainese    时间: 2010-11-19 13:26

可以选用辣根过氧化酶(HRP)直接标记的二抗,从而避免内源性生物素引起的肾小管非特异性反应。
作者: leecheul    时间: 2010-11-19 16:36

谢谢两位,斑竹的意思是本应选择二步法,不应是三步法意思么?
作者: shanghainese    时间: 2010-11-20 12:05

因为您所用的三步法里有生物素-亲和素系统。而肾小管有大量的内源性生物素,必然造成“非特异性反应“。
作者: leecheul    时间: 2010-11-24 16:56

再次谢谢,请问版主对icam-1了解吗?大鼠肾脏免疫组化准确表达位置应该是哪里呀。
作者: shanghainese    时间: 2010-11-25 11:38

看看文献,网上也有许多CD54的文章。




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